細胞接着・転移におけるCas/Fakの相互作用

Cas/Fak 相互作用在细胞粘附和转移中的作用

• 批准号: 07273264
• 负责人: 堺 隆一
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07273264/
• 关键词: P130^<cas>; Fak; Src; v-Crk; インテグリン; SH2; SH3; Fyn

活性型Srcやv-Crkにより形質転換した細胞での主要なチロシンリン酸化蛋白質の一つであるp130は、これらの形質転換において重要な役割を担う蛋白質であると考えられていたが、その実体は不明であった。1994年、代表研究者らは、このp130のクローニングに成功し、Casと名付けた。本年度は、Casについて、以下の解析を行った。1 Casのv-Crk、活性型Srcとの結合様式を解析した。活性型SrcはそのSH2領域およびSH3領域の両者を介して、Casと結合していることが判明した。SrcのSH3は、Casの733アミノ酸残基付近のプロリン豊富領域に結合し、SH2は762アミノ酸残基のチロシンに結合すると考えられた。一方、v-Crkは、そのSH2領域が、Casの中でYXXPモチーフが15回繰り返し出現する基質領域と名付けた領域に、結合することがわかった。2 マウス線維芽細胞において、Casにはチロシンキナーゼ活性が結合しており、それをCask活性と名付けた。様々なチロシンキナーゼのノックアウト細胞において、Cask活性を比較的したところ、Fynのノックアウト細胞において、Cask活性の著明な減少を認めた。また、v-Crkの導入による形質転換に伴うCask活性の上昇も、Fynのノックアウト細胞では認められなかった。これらの事から、Caskの主体はFynであると考えられる。3 Cas、Fakの相互作用Fakのノックアウト細胞では、Cask活性の変化はほとんど認められなかった。また、抗Fak抗体によるin vitro kinase反応でも、FakがCasをリン酸化しているという証拠は得られなかった。

Active Src-Crk is the main protein in the cell, p130, and the main protein in the cell. In 1994, the representative researcher, This year, Cas, the following analysis 1 Cas v-Crk, active-Src and their binding formula were analyzed. Active Src is identified by the combination of SH2 domain and SH3 domain. Src, Cas, 733, 762, 763, 764, 765, 766, 765, A square, v-Crk, SH, 2 fields, Cas, YXXP, 15 returns, matrix fields, name fields, combinations, etc. 2. The cells of the cell line were cultured, and the cells were cultured. The decrease of Cask activity in Fyn cells was also observed. The introduction of v-Crk is accompanied by an increase in Cask activity, and Fyn's cell is recognized. The main body of the Cask is Fyn. 3 Cas, Fak interaction Fak no Anti-Fak antibodies are detected in vitro kinase and Fak Cas are detected in vitro.

项目成果

Nojma Y Morimo N Miura T Hamasaki K, Furuya H. Sakai R et al: "Integrin-mediated cell adhesion promotes tyrosine phosphorylation of P130^<Cas> a Src homology 3 containing molecule having multiple Src homology^2 bindig motifr" Journal of Biological Chemist

Nojma Y Morimo N Miura T Hamasaki K、Furuya H. Sakai R 等人：“整合素介导的细胞粘附促进 P130^<Cas> 含有 Src 同源 3 的分子的酪氨酸磷酸化，该分子具有多个 Src 同源^2 结合基序”《生物学杂志》

Mayer B. J. Hirai H Sakai R: "Evidence that SH2 domains promote processive phosphorylation by protein-tyrosine kinases" Current Biology. 5. 296-305 (1995)

Mayer B. J. Hirai H Sakai R：“SH2 结构域促进蛋白酪氨酸激酶进行性磷酸化的证据”《当代生物学》。

Nakamoto T, Sakai R, Ozawa K, Yazaki Y, Hirai H.: "Direct binding of C-terminal region of PBO^<Cas> to SH2 and SH3 domains of Src kinase" Journal of Biological Chemistry. (in press).

Nakamoto T、Sakai R、Ozawa K、Yazaki Y、Hirai H.：“PBO^<Cas> 的 C 末端区域与 Src 激酶的 SH2 和 SH3 结构域的直接结合”生物化学杂志。