Analysis of reversible oncogenic signals in the pregression of neuroblastoma

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神経芽腫におけるPTP-RZの役割を知るため、初年度に樹立したsiRNAをもちいたPTP-RZタンパク質の発現抑制の系と、クローニングしたcDNAを用いたPTP-RZタンパク質の強制発現の系を用いた系を使ってRTP-RZの発現と神経芽腫の特性の関わりに関する解析を進めた。ホスファターゼ活性を測定するため、内在性の基質として報告されているパキシリンのリン酸化をイムノブロットにより検出する系も導入した。PTP-RZの発現がある程度見られる神経芽腫数種でPTP-RZの発現が細胞増殖・細胞運動・細胞形態・増殖因子下流シグナル（ERK、AKT）に与える影響について解析を行った。結果として、用いた神経芽腫細胞ではPTP-RZの絶対的な発現量がそれほど多くないこともあり、神経芽腫の進行やそれに関わるALKキナーゼの逆反応としてのPTP-RZの役割は明確に確認することができなかった。公開データベースを用いて、神経芽腫患者組織においては、PTP-RZの発現量が高いことが神経芽腫の予後良好と関与していることが示すことができているので、発現の高い細胞株の選択やオルガノイドカルチャーなどによってPTP-RZの発現が神経芽腫の特性に影響を与える条件を探索している。またPTP-RZ以外の増殖制御に関わるホスファターゼとして、PTP-PESTが神経芽腫に中程度に発現し、やはり発現が高い方が神経芽腫の予後良好につながることを見いだしたため、現在特異抗体による発現解析やALKのリン酸化基質に対する影響の解析などを行っている。