MRPの薬剤輸送機能とイオンチャネル活性の解折

阐明 MRP 的药物转运功能和离子通道活性

• 批准号: 07276232
• 负责人: 古川 龍彦
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07276232/
• 关键词: MRP; 多剤耐性; グルタチオン抱合体ポンプ

MRPの抗ペプチド抗体で免疫組織化学的に、気管支線毛細胞、副腎皮質、腎尿細管などに高く、消化管で低く、神経系にはないなど正常組織の発現を検討した。臨床例の肺、大腸、胃の癌と正常部でMRPのmRNAと蛋白質の発現を見た。肺扁平上皮癌では9例中8例で高く、4例は抗癌剤感受性株の3.6倍以上で、肺扁平上皮癌の耐性にMRPの関与が強く示唆された。MRP高発現細胞株C-A120とシスプラチン耐性株KCP-4のmembrane vesicleを用いて、ロイコトルエンC4(LTC4)の輸送とその輸送の薬剤での阻害について検討し、二つの細胞のグルタチオン抱合体ポンプを比較をした。両細胞のmembrane vesicleはともにin vitroでLTC4を能動輸送し、Km値は1.550、0.455μMでVmaxは308、4.447mol/ng/proteinであった。C-A120ではLTD4でKCP-4ではグルタチオン抱合体シスプラチンでより強くLTC4の輸送が阻害された。MRPはグルタチオン抱合体排出ポンプとして働く事が明らかになった。また、KCP-4細胞のグルタチオン抱合体排出ポンプはMRPとは特異性が異なる事が示唆された。グルタチオン合成阻害剤BSOはC-A120のmembrane vesicleのLTC4の輸送を阻害せず、ビンクリスチンの細胞内濃度を上昇させ、耐性度を低下させた。BSOはグルタチオン濃度低下させて、耐性を克服したと考えられ、ビンクリスチンがグルタチオン抱合され輸送されている事が示唆された。ピリジン誘導体PAK104PはP-糖蛋白質の機能を阻害するが、MRPのLTC4の輸送も阻害し、C-A120のビンクリスチン耐性を克服した。PAK104Pは広いスペクトラムの有望な抗ガン剤多剤耐性克服薬剤と考えられた。

Anti-MRP antibodies were detected by immunohistochemistry, and the development of normal tissues was studied. MRP mRNA and protein expression in lung, large intestine and stomach cancer and normal tissues were observed in clinical cases. 8 cases of squamous cell carcinoma were higher than 9 cases, 4 cases were more than 3.6 times of anti-cancer susceptible strains, and MRP was related to resistance of squamous cell carcinoma. To investigate the use of membrane vesicles of MRP high-producing cell line C-A120 and resistant cell line KCP-4, to compare the resistance of transport and transport agents of MRP high-producing cell line C-A120 and resistant cell line KCP-4 (LTC4). Cell membrane vesicles are in vitro and LTC4 is actively transported. Km values are 1.550, 0.455μM and Vmax is 308, 4.447 mol/ng/protein. C-A120, LTD4, KCP-4, LTC 4, LTC 4, LTC-4, LTC-4, LTC The MRP is the first to release the complex. KCP-4 cells are expressed in a variety of different ways. BSO, a synthetic inhibitor of C-A120, inhibits the transport of LTC4, increases the intracellular concentration of C-A120, and decreases the tolerance. The concentration of BSO is low, and the resistance is high. PAK 104P overcomes the functional inhibition of P-glycoprotein, the transport inhibition of MRP LTC4, and the resistance of C-A120 to protein degradation. PAK104P is expected to be resistant to multi-agent resistance.

项目成果

Yuji Takebayashi: "The activity and expression of thymidine phosphorylase in human solid tumor" The European Journal of Cancer. (印刷中). (1996)

Yuji Takebayashi：“人类实体瘤中胸苷磷酸化酶的活性和表达”欧洲癌症杂志（1996 年）。

Isamu Sugawara: "Expression of multidrug resisitance-associated protin(MRP)in thyroid cancers" Cancer letters. 95. 135-138 (1995)

Isamu Sukawara：“甲状腺癌中多药耐药相关蛋白（MRP）的表达”癌症信件。

Kazutaka Miyadera: "Structural characterization of thymidine phosphorylase purified from placenta" Biochemical and Biophisical Research Communication. 212. 1040-1045 (1995)

Kazutaka Miyadera：“从胎盘中纯化的胸苷磷酸化酶的结构特征”生物化学和生物物理学研究通讯。

Yutaka Chuman: "Expression of the multidrug resisitance-associated protin(MRP)gene in human colorectal,gastric and non-small cell lung carcinomas" International Journal of Cancer. (印刷中). (1996)

Yutaka Chuman：“人类结直肠癌、胃癌和非小细胞肺癌中多药耐药相关蛋白 (MRP) 基因的表达”，国际癌症杂志（1996 年出版）。

Yuji Takebayashi: "Angiogenesis as an unfavorable prognostic factor in human colorectal carcinoma" Cancer. (印刷中). (1996)

Yuji Takebayashi：“血管生成是人类结直肠癌的不利预后因素”（出版中）。