MRPの薬剤輸送機能とイオンチャネル活性の解折

阐明 MRP 的药物转运功能和离子通道活性

基本信息

批准号：
07276232
负责人：
古川龍彦
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Kagoshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07276232/
关键词：
MRP 多剤耐性グルタチオン抱合体ポンプ

项目摘要

MRPの抗ペプチド抗体で免疫組織化学的に、気管支線毛細胞、副腎皮質、腎尿細管などに高く、消化管で低く、神経系にはないなど正常組織の発現を検討した。臨床例の肺、大腸、胃の癌と正常部でMRPのmRNAと蛋白質の発現を見た。肺扁平上皮癌では9例中8例で高く、4例は抗癌剤感受性株の3.6倍以上で、肺扁平上皮癌の耐性にMRPの関与が強く示唆された。MRP高発現細胞株C-A120とシスプラチン耐性株KCP-4のmembrane vesicleを用いて、ロイコトルエンC4(LTC4)の輸送とその輸送の薬剤での阻害について検討し、二つの細胞のグルタチオン抱合体ポンプを比較をした。両細胞のmembrane vesicleはともにin vitroでLTC4を能動輸送し、Km値は1.550、0.455μMでVmaxは308、4.447mol/ng/proteinであった。C-A120ではLTD4でKCP-4ではグルタチオン抱合体シスプラチンでより強くLTC4の輸送が阻害された。MRPはグルタチオン抱合体排出ポンプとして働く事が明らかになった。また、KCP-4細胞のグルタチオン抱合体排出ポンプはMRPとは特異性が異なる事が示唆された。グルタチオン合成阻害剤BSOはC-A120のmembrane vesicleのLTC4の輸送を阻害せず、ビンクリスチンの細胞内濃度を上昇させ、耐性度を低下させた。BSOはグルタチオン濃度低下させて、耐性を克服したと考えられ、ビンクリスチンがグルタチオン抱合され輸送されている事が示唆された。ピリジン誘導体PAK104PはP-糖蛋白質の機能を阻害するが、MRPのLTC4の輸送も阻害し、C-A120のビンクリスチン耐性を克服した。PAK104Pは広いスペクトラムの有望な抗ガン剤多剤耐性克服薬剤と考えられた。

使用MRP的抗肽抗体（例如支气管纤毛细胞中的高，肾上腺皮质，肾小管肾小管等）研究了正常组织的表达，在胃肠道中较低，而不是在神经系统中。 MRP mRNA和蛋白质表达在肺部大肠和胃癌以及临床病例的正常区域中观察到。在9例中，有8例中8例肺部的鳞状细胞癌高于抗癌药物敏感性菌株的3.6倍以上，表明MRP参与抗性肺癌的抗性。使用表达MRP高的细胞系C-A120和抗顺铂的菌株KCP-4的膜囊泡，我们研究了白细胞素C4（LTC4）的运输（LTC4）的运输，并用剂抑制其转运剂，并比较了两个细胞的谷胱甘肽泵。两个细胞的两个膜囊泡在体外积极运输LTC4，KM值为1.550、0.455μm，VMAX为308，而4.447 mol/ng/protin。在C-A120中，LTD4和KCP-4中更强烈抑制LTC4的转运，谷胱甘肽偶联的顺铂。已经揭示了MRP充当谷胱甘肽结合泵。还提出，KCP-4细胞的谷胱甘肽缀合物外排泵的特异性与MRP不同。谷胱甘肽合成抑制剂BSO不抑制膜囊泡中C-A120的LTC4转运，从而增加了vincristine的细胞内浓度并降低了耐药性。 BSO似乎降低了谷胱甘肽浓度以克服抗性，这表明长春新碱是通过谷胱甘肽缀合和运输的。吡啶衍生物PAK104P抑制了p-糖蛋白的功能，但也抑制了LTC4在MRP中的转运，从而克服了C-A120的长春克氨酸耐药性。 PAK104P被认为是一种有前途的抗癌药物，具有广泛的光谱和一种克服多药耐药性的药物。