アポトーシスのクロマテン凝縮におけるリン酸化ヒストンドメインの機能

磷酸化组蛋白结构域在凋亡染色质凝聚中的功能

• 批准号: 07282224
• 负责人: 網代 廣三
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Aichi Cancer Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07282224/
• 关键词: アポトーシス; シグナル伝達; クロマテン; ヌクレオソーム

7年度は主にHL-60細胞のアポトーシスおいて、1)DNAの断片化が実際にヌクレオソーム構造に由来するか否か、2)ヌクレオソーム蛋白の特異的なリン酸化、について詳細に分析し、種々のアポトーシスにおけるそれらのリン酸化の普遍性、そのリン酸化サイト及び、リン酸化に係わるリン酸化酵素、について解析した。その結果:1。アポトーシス細胞では、通常in vivoではリン酸化されないヒストンH2Bがリン酸化され、染色体凝縮期(M期)のみに見られるH3のリン酸化が低レベル生じていた。これらのリン酸化は、誘導源(VP-16等の抗がん剤,Fas抗原,脱リン酸化酵素阻害剤),細胞種(HL-60, HeLa, thymocyte),動物種(human, rat),の違いを越えて観察された。2。これらのアポトーシスに特異的なH2Bリン酸化部位は塩基性の高い領域にあり、N末端側のグロビュラー構造に隣接するドメインにあるSer残基であった。3。このH2Bのサイトをリン酸化する酵素は不明だが、in vitroでは、Cキナーゼによってリン酸化されるサイトの一つであることが分った。一方、H3のリン酸化はM期にリン酸化されるサイト(Ser10)以外の数カ所がリン酸化されていた。4。また、アポトーシス細胞から分離された可溶化クロマチンにおいてもDNAラダーが見られ、H1と結合したヒストン8量体と複合体を作り、ヌクレオソーム構造を維持していた。したがって、これらのDNAの断片の多くは断片化ヌクレオソームに由来すると考えられた。

7 year は main に - HL 60 cells の ア ポ ト ー シ ス お い て, 1) の DNA fragment が be interstate に ヌ ク レ オ ソ ー ム tectonic に origin す る か no か, 2) ヌ ク レ オ ソ ー ム の specific protein な リ ン acidification, に つ い て し に analysis in detail, the kind of 々 の ア ポ ト ー シ ス に お け る そ れ ら の リ ン acidification の universality, そ の リ ン acidification サ <s:1> ト and び, リ <s:1> acidifying に series わるリ <s:1> acidifying enzymes, に て て て て analysis of た. Youdaoplaceholder0 そ result :1. ア ポ ト ー シ ス cells で は, usually in vivo で は リ ン acidification さ れ な い ヒ ス ト ン H2B が リ ン acidification さ れ, chromosome condensation period (M) の み に see ら れ る H3 の リ ン acidification が low レ ベ ル raw じ て い た. こ れ ら の リ ン acidification は, induced source (VP - 16 の resistance が ん, Fas antigen, take off the リ ン harm one of acidic enzyme inhibitor), cell kind (HL - 60, HeLa, thymocyte), animals (human, rat), の violations い を more え て 観 examine さ れ た. 2 こ れ ら の ア ポ ト ー シ ス に specific な H2B リ ン acidification parts は high salt basic の い field に あ り, N terminal side の グ ロ ビ ュ ラ ー tectonic に 隣 meet す る ド メ イ ン に あ る Ser residues で あ っ た. 3 こ の H2B の サ イ ト を リ ン acidification す る enzyme は unknown だ が, the in vitro で は, C キ ナ ー ゼ に よ っ て リ ン acidification さ れ る サ イ ト の a つ で あ る こ と が points っ た. One party, H3 <s:1> リ <s:1> acidification にリ M stage にリ <s:1> acidification されるサ ト ト(Ser10) other than <s:1> number カ がリ <s:1> acidification されて されて た た た. 4 ま た, ア ポ ト ー シ ス cells か ら separation さ れ た solubilization ク ロ マ チ ン に お い て も DNA ラ ダ ー が see ら れ, H1 と combining し た ヒ ス ト ン 8 quantity body と complex を り, ヌ ク レ オ ソ ー ム tectonic を maintain し て い た. し た が っ て, こ れ ら の の DNA fragment の more く は fragment the ヌ ク レ オ ソ ー ム に origin す る と exam え ら れ た.

项目成果

Ajiro et al: "Alteration of Cell Cycle-dependent Histone Phosphorylations by Okadaic Acid" The Journal of Biological Chemistry. (in press).

Ajiro 等人：“冈田酸改变细胞周期依赖性组蛋白磷酸化”《生物化学杂志》。