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モデル膜を使用した溶血性タンパク質の膜チャンネル(超分子)形成機構の研究

利用模型膜研究溶血蛋白的膜通道（超分子）形成机制

基本信息

批准号：
08219203
负责人：
冨田敏夫
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08219203/
关键词：
膜チャネル溶血毒素担子菌ヒラタケ超分子

项目摘要

溶血性タンパク質の中には、標的細胞の膜に"穴"(膜チャネル)を形成するタンパク質が存在し、チャネル形成タンパク質と呼称されている。チャネル形成タンパク質は、水溶性タンパク質として単離されるが、細胞膜へ結合した後にはあたかも膜タンパク質であるかのごとく挙動する。すなわち、この種のタンパク質は、生体膜との相互作用により両親媒性を獲得して膜へ結合し、膜の表面において互いに集合して膜チャネル超分子を形成する。本研究では、我々が担子菌の一種ヒラタケ(Pleurotus ostreatus)の子実体に見いだした二成分性溶血素、POHを取り上げて、2種類のタンパク質が膜の表面で集合してチャネル超分子を形成する仕組みについて解析した。ヒラタケの子実体抽出液から種々のカラムクロマトグラフィを等電点電気泳動法を組み合わせてヒラタケ溶血素の二成分、POH-A (15kDa)およびPOH-B (59kDa)を精製した。POHは赤血球内の低分子の流出を起こし赤血球を膨潤させることなどから、POHはチャネル形成毒素であると推定された。ヒト赤血球にPOHが形成する膜チャネルの大きさを測定した結果、POHは直径4nmの親水性チャネルを形成する事実が示された。この膜チャネルの分子的実体を解明するためにPOHの膜結合性を調べた結果、(1) A成分はスフィンゴミエリン結合タンパク質であり、(2) A成分が赤血球膜へ結合した後にB成分が結合して、(3)両者は赤血球膜の表面において集合して>700kDaのA-B複合体を形成する事実が明らかになった。このA-B複合体超分子が膜チャネルの分子的実体であると考えれる。溶液中では共存していても互いに結合しないPOHの二成分は、脂質膜の表面においては効率的に集合して機能性超分子を形成することが明らかにされた。

In the hemolytic disease, the cell membrane "acupoint" forms the membrane "acupoint", the cell membrane "acupoint" forms the cell membrane "acupoint", the cell membrane "acupoint" forms the cell membrane "acupoint", the " After the formation of the enzyme, the water-soluble resin, the membrane membrane, the membrane and the membrane. The combination of the membrane, the surface of the membrane, the collection of the surface of the membrane, the formation of the supramolecular membrane, the interaction of the biofilm, the medium of the biofilm, the combination of the membrane and the surface of the membrane. In this study, we isolated two-component hemolysin from a kind of basidiomycetes (Pleurotus ostreatus), and we collected two-component hemolysin from the surface of the membrane. The body extract of Ligusticum mongolicum was used to determine the composition of hemolysin, POH-A (15kDa), POH-B (59kDa) and so on. The efflux of low molecular weight in POH red blood cells caused by red blood cell swelling, red blood cell swelling, red blood cell formation, POH toxin formation and presumption of red blood cell formation. The formation of red blood cells (POH), the formation of red blood cells (RBC), the formation of red blood cells (RBC), the formation of red blood cells (POH), the formation of red blood cells (RBC), the formation of red The molecular structure of the membrane is characterized by the combination of the POH and the membrane. The results are as follows: (1) the combination of the A component, the red blood cell membrane, the red blood cell membrane and the red blood cell membrane. The 700kDa Amurb complex forms a clear picture of the situation. The molecular structure of the Amurb complex supramolecular membrane membrane was studied. In the solution, the combination of the two components of POH and the aggregation of functional supramolecular compounds on the surface of lipid membranes is characterized by the formation of complex molecular complexes.