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ブドウ球菌ロイコシジン及びγヘモリジンの血球識別機構の解析

葡萄球菌杀白细胞素和γ溶血素的血细胞辨别机制分析

基本信息

批准号：
08670298
负责人：
冨田敏夫
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

黄色ブドウ球菌のロイコシジン及びγヘモリジンは、二成分のタンパク質(ロイコシジンSとF、γヘモリジンHγIとHγII)から成る細胞崩壊毒素である。我々は両毒素の遺伝子を世界に先駆けてクローニングして、異種タンパク質と考えられていたロイコシジンFとγヘモリジンHγIが同一遺伝子産物である事実(F=HγI)を見いだした。本研究では、γヘモリジンの血球崩壊機構を解明するために、両毒素の二成分系が標的細胞の細胞膜において膜孔(membrane pore)複合体を形成する可能性について検討した。(1)大きさの異なる非電解質分子(ポリエチレングリコールまたは中性糖)を血球外液に添加した条件下で、ヒト赤血球に対するγヘモリジンの活性を測定し、γヘモリジンがヒト赤血球膜に内径約2.5nmの膜孔を形成する可能性を示した。(2)電子顕微鏡を使用した研究により、γヘモリジンは赤血球の膜表面に内径約7nm外径約3nmのリング状構造体を形成する事実を明らかにした。(3)ヒト赤血球に結合したγヘモリジンを界面活性剤で可溶化後にWestern Immunoblotした結果から、γヘモリジンの二成分は赤血球膜において約200kDaの複合体を形成する可能性が示された。以上の結果から、ブドウ球菌のγヘモリジンは赤血球膜で約200kDaの大きさの複合体を形成し、この毒素複合体が約2.5nmの膜孔を形成して細胞膜内外の浸透圧平衡を崩して溶血を起こすと考えられる。

The two components of the toxin (S, F, HγI and HγII) are produced by the yellow virus. The first step in the development of the toxin gene is to establish a new gene, and a new gene. This study investigated the mechanism of hemolysis and the possibility of the formation of membrane pore complexes in target cells by two-component systems of cytotoxins. (1)To determine the activity of the non-electrolyte molecule (neutral sugar) in the erythrocyte membrane under the condition of addition of large heterogeneous non-electrolyte molecule (neutral sugar) to the extracellular fluid, and to show the possibility of formation of membrane pores with an inner diameter of about 2.5 nm in the erythrocyte membrane. (2)Through research on the use of electronic micromirrors, it has become clear that γ-rays are formed on the membrane surface of red blood cells as a ring-like structure with an inner diameter of about 7nm and an outer diameter of about 3nm. (3)The results of Western Immunoblot after solubilization with an interfacially active agent show the possibility of formation of a complex of approximately 200kDa in the two-component erythrocyte membrane. As a result, a large 200kDa complex was formed in the red blood cell membrane, and a pore of about 2.5 nm was formed in the toxin complex. The osmotic pressure balance between the inside and outside of the cell membrane was disrupted.