小胞体膜由来クロライドチャネルの機能と構造に関する研究

内质网膜源性氯离子通道功能与结构研究

• 批准号: 08268220
• 负责人: 川野 誠子
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08268220/
• 关键词: クロライドチャネル; 筋小胞体; ATP通過; CFTR; 人工脂質膜; 電気生理学

本研究は細胞内オルガネラである筋小胞体に存在するクロライドチャネル(SR-CIチャネル)の機能調節機構と構造解明を目的とする。今迄の検討の結果SR-CIチャネルはcyclic AMP依存性燐酸化により活性化される事、その電気生理学的特性(イオン透過性、Ca^<2+> 非依存性、電位非依存性等)が気管上皮に発現しているcystic fibrosis transmembrane regulator(CFTR)と類似している事を明らかとなった。またCFTR抗体を用いたウェスタンブロットの結果、SR-CIチャネルは構造的にもN末端及びRドメインがCFTRと類似していることが判明し、ATP駆動型トランスポータータイプのチャネルであると推測された。ATP駆動型トランスポータータイプのクロライドチャネルに関してはATP通過機能の有無が最近論争の的となっているが未だ決着がついていない。我々のSR-CIチャネルのATP通過機能の検討では、人工脂質二重膜に再構成したチャネルは陰イオンを全てtris ATPやNa_2ATP,K_2ATP(83mM又は200mM)に置換した場合もチャネルの開口が保持されていた。これらの条件下でのコンダクタンスや、逆転電位の変化より,SR-CIチャネルはATPを通過させることが判明した。以上の結果は小胞体のcyclic AMP依存性燐酸化によって活性化されるクロライドチャネルは、アニオン以外の物質であるATPを通過させ得ることが明らかとなり、その生理機能として細胞内物質や代謝産物の輸送に寄与していることが推測された。

This study は intracellular オ ル ガ ネ ラ で あ る reinforced small cell body exist に す る ク ロ ラ イ ド チ ャ ネ ル (SR - CI チ ャ ネ ル) の function adjusting mechanism purpose and interpret を と structure と す る. This effect の beg の 検 results SR - CI チ ャ ネ ル は cyclic AMP dependency 燐 acidification に よ り activeness さ れ る, そ の electric 気 physiology characteristic (イ オ ン through sex, Ca ^ 2 + > < not dependence, potential dependency, etc.) が 気 epithelial に 発 now し て い る cystic fibrosis The transmembrane regulator(CFTR)と is similar to て る る る and を Ming ら となった となった となった. Antibody を use い ま た CFTR た ウ ェ ス タ ン ブ ロ ッ ト の results, SR - CI チ ャ ネ ル は constructed に も N terminal and び R ド メ イ ン が CFTR と similar し て い る こ と が.at し type, ATP 駆 ト ラ ン ス ポ ー タ ー タ イ プ の チ ャ ネ ル で あ る と speculation さ れ た. ATP 駆 moving type ト ラ ン ス ポ ー タ ー タ イ プ の ク ロ ラ イ ド チ ャ ネ ル に masato し て は ATP through function の presence of が recent controversy の と な っ て い る が だ not definitely the が つ い て い な い. I 々 の SR - CI チ ャ ネ ル の ATP through function の beg で 検 は に, artificial lipid double membrane reconstitution し た チ ャ ネ ル は Yin イ オ ン を full て tris ATP や Na_2ATP, K_2ATP (83 mm and 200 mm) は に replacement し た occasions も チ ャ ネ ル の openings が keep さ れ て い た. こ れ ら の conditions で の コ ン ダ ク タ ン ス や, inverse planning potential の variations change よ り, SR - CI チ ャ ネ ル は ATP を through さ せ る こ と が.at し た. の above results は small cell body の cyclic AMP dependency 燐 acidification に よ っ て activeness さ れ る ク ロ ラ イ ド チ ャ ネ ル は, ア ニ オ ン の outside material で あ る ATP を through さ せ must る こ と が Ming ら か と な り, そ の physiology と し て intracellular material の conveying に send や metabolites and し て い る こ と が speculation さ れ た.

项目成果

Sakai,F.: "Electrophysialogical effects of beta-blocking agent ; tilisolol,on isolated guine a pig Vlnticular myrocytes." J.Cardiovascular Pharmacol Therapent.1. 41-48 (1996)

Sakai，F.：“β-阻滞剂；替利索洛尔对分离的豚鼠和猪的肌细胞的电生理作用。”

Furukawa,T.: "Functional blokage of the cardian ATP-sensitive K^+ channels to action cytoskeletin" Phlyers Arch.431. 504-512 (1996)

Furukawa,T.：“贲门 ATP 敏感 K^ 通道对细胞骨架起作用的功能性阻断”Phlyers Arch.431。

Hiraoka,M.: "Mechanisms of openings and role of the ATP-Sensitve K^+ channels during-" Pathophysiology of Heart Failuree. 427-437 (1996)

Hiraoka,M.：“ATP 敏感 K^ 通道的开放机制和作用”，心力衰竭的病理生理学。

Ishihara,K.: "The betravalent organe cation spermine coiuset ca gating of the TRK1 Channel expressed in munine gibroblasf cells." Journal of Physiology. 491. 367-382 (1996)

Ishihara,K.：“二价有机阳离子精胺对小鼠成纤维细胞中表达的 TRK1 通道进行门控。”