DI型ドーパミン受容体とカップルするアデニル酸シクラーゼの多様性に関する研究

DI型多巴胺受体偶联腺苷酸环化酶多样性研究

• 批准号: 08270201
• 负责人: 木村 和弘
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08270201/
• 关键词: D1ドーパミング受容体; ドーパミン; アデニル酸シクラーゼ; サイクリックAMP; SK-N-MC

D1ドーパミン受容体は主に、GTP結合蛋白質Gsαを介してアデニル酸シクラーゼ(AC)を刺激し、cyclicAMP濃度を上昇させる。この系は幾つかの段階、特に受容体とG蛋白質レベルで調節を受けるが、サブタイプによって異なった活性調節を受けるACレベルでの調節は明らかではない。本研究ではヒト神経芽細胞種SK-K-MC細胞を用いてD1受容体がどのサブタイプのACとカップリングし得るかを明らかとすることを目的とし解析を行った。その結果、(1)ACの各サブタイプに保存された領域をプライマーとしてRT-PCR法を行い、この細胞にmRNAとして発現するACのサブタイプはtype3(Ca^<2+>-calmodulin-dependent stimulation), type6(Ca^<2+>-and protein kinase A-dependent inhibition)およびtype7(protein kinase C-dependent stimulation)であること、(2)type6およびtype7ACは機能的にも発現しているが機能的なtype3AC活性は見られないこと、(3)各々のAC活性を変化させた場合、ドーパミンによるcyclicAMP産生はAC活性の変化に対応すること、また(4)protein kinase Aを介してtype6ACを抑制した条件下ではDI受容体刺激は大きく抑制されることが明らかとなった。D1受容体が豊富なラット線条体ではtype6 ACと同様の調節を受けるtype5ACが主に発現しており、生体内においてもD1受容体を介するシグナルがACレベルで同じ調節を受ける可能性があり、ACの組織内での発現の違いがそのcAMPを産生させる受容体シグナルの多様性を規定する一因であることが示唆された。

D1多巴胺受体主要通过GTP结合蛋白GSα刺激腺苷酸环化酶（AC），并增加了环light的浓度。该系统在几个阶段进行调节，尤其是在受体和G蛋白水平上，但尚不清楚在AC水平上调节活动，该AC水平取决于亚型的活性变化。在这项研究中，我们使用人类神经细胞型SK-K-MC细胞分析了结果，以揭示哪种AC D1受体的亚型可以伴随。 As a result, RT-PCR was performed using the regions conserved in each subtype of AC as primers, and it was revealed that the subtypes of AC expressed as mRNA in these cells are type3 (Ca^<2+>-calmodulin-dependent stimulation), type6 (Ca^<2+>-and protein kinase A-dependent inhibition), and type7 (protein kinase C-dependent stimulation), (2) type6 and type7 AC are functionally expressed but no functional type3AC activity is observed, (3) when each AC activity is altered, cyclic AMP production by dopamine corresponds to changes in AC activity, and (4) DI receptor stimulation is greatly suppressed under conditions in which type6AC is suppressed via protein kinase A. Type5AC, which is highly concentrated in the rat striatum, is primarily expressed, which is modulated similarly to type6 AC,并且通过D1受体的体内信号可以在AC水平上受到相同的调节，这表明组织内交流表达的差异是定义产生cAMP的受体信号多样性的一个因素。

项目成果

Sidhu, A., et al.: "Molecular and stractural differences between rat brain D-1 and renal DA-1 dopamine receptors." Neurosci. Res.(印刷中). (1997)

Sidhu, A. 等人：“大鼠脑 D-1 和肾 DA-1 多巴胺受体之间的分子和结构差异。”（出版中）。

Sidhu, A., et al.: "A novel regulation of expression of the α-subunit of the G stimulatory protein, Gsα, by dopamine via D-1 dopamine receptors." J. Neurochem.68. 187-194 (1997)

Sidhu, A. 等人：“多巴胺通过 D-1 多巴胺受体对 G 刺激蛋白 α 亚基表达的新调节。J. Neurochem.68 (1997)。

Sela, S., et al.: "Dysfunctional DIA receptor/G protein coupling in proximal tubules of spontaneously hypertensive rats is not due to abnormal G proteins." J. Hypertension.(印刷中). (1997)

Sela, S., et al.：“自发性高血压大鼠近端肾小管功能失调并非由异常 G 蛋白引起。”（正在出版）。