ループの協調的スウィングによるミトコンドリアADP/ATP透過担体の輸送機能発現

环协同摆动表达线粒体 ADP/ATP 通透性载体转运功能

• 批准号: 09257234
• 负责人: 寺田 弘
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09257234/
• 关键词: ADP; ATP透過担体; ミトコンドリア; 溶質輸送担体; キャリアー; トランスポーター; 構造機能協関

我々はミトコンドリア内膜に存在するADP/ATP透過担体の機能発現機構に関する研究を行い、これまでにマトリックス側に突出したループが、それぞれゲート、基質結合の主要な部位として機能していることを見いだし、ループの協調的な立体配置の変化により輸送機能が発現するという、Cooperative Swinging Loop Modelを構築した.このモデルに基づき、より詳細な分子レベルでの輸送機能発現機構の解明を目的として、本年度は以下に示す成果を得た.1.部位特異的プロテアーゼによる切断反応の解析リジルエンドペプチダーゼによる切断の様式を解析し、輸送に際してループの大きな立体配置変化が起こっていることをより直接的に証明することができた.2.架橋形成反応の解析界面活性剤で活性を保持したまま膜から可溶化した担体では、銅オルトフェナンスロリンによる分子間架橋形成は起こらず、第1ループのCys56と第3ループのCys256の間で分子内の架橋形成反応が起こることを明らかにした.3.スチルベン誘導体の選択的標識反応この透過担体に対するスチルベン誘導体の反応性を解析し、第1膜貫通セグメント内にあるLys22を選択的に修飾することを初めて明らかにした.4.組み換えウシ心筋型ADP/ATP透過担体の発現系の確立酵母の内在性ADP/ATP透過担体の2種類の遺伝子を破壊したのち、ウシ心筋型同透過担体のcDNAを組み込んだプラスミドを導入し、酵母ミトコンドリアに機能を保持したウシ心筋ADP/ATP透過担体を発現させることに成功した.

I 々 は ミ ト コ ン ド リ ア lining に exist す る ADP/ATP through supporter の function 発 institutions now に masato す る research を い, こ れ ま で に マ ト リ ッ ク ス side に prominent し た ル ー プ が, そ れ ぞ れ ゲ ー ト, matrix combined with main な part の と し て function し て い る こ と を see い だ し, ル ー プ の coordination な stereo configuration の variations change に よ り Conveying function が 発 now す る と い う, Cooperative Swinging Loop Model を build し た. こ の モ デ ル に base づ き, よ り detailed な molecular レ ベ ル で の conveying function 発 institutions now の interpret を purpose と し て, this year's は た に を す results indicated below. 1. Site specific プ ロ テ ア ー ゼ に よ る cut off against 応 の parsing リ ジ ル エ ン ド ペ プ チ ダ ー ゼ に よ る cut の others in analytical し, transmission type を に interstate し て ル ー プ の big き な stereo configuration variations change since が こ っ て い る こ と を よ り directly に prove す る こ と が で き た. 2. Bridge formed the 応 の parse interface active tonic で activity was を し た ま ま membrane か ら solubilization し た supporter で は, copper オ ル ト フ ェ ナ ン ス ロ リ ン に よ る intermolecular bridge formation は こ ら ず, 1 ル ー プ の Cys56 と 3 ル ー プ の Cys256 の between で intramolecular の bridge formed the 応 が up こ る こ と を Ming ら か に し た. 3. ス チ ル ベ ン inductor の sentaku identification inverse 応 こ の through supporter に す seaborne る ス チ ル ベ ン inductor の 応 sex analytical し を, 1 transmembrane セ グ メ ン ト within に あ る Lys22 を sentaku に modification す る こ と を early め て Ming ら か に し た. 4. Group み in え ウ シ ADP/ATP through the heart muscle type supporter の 発 now is の establish yeast の internality ADP/ATP through supporter の 2 kinds の heritage 伝 son を broken 壊 し た の ち, ウ シ heart muscle type with through supporter の cDNA を group み 込 ん だ プ ラ ス ミ ド を import し, yeast ミ ト コ ン ド リ ア に function を keep し た ウ シ heart muscle ADP/ATP The carrier を occurs させる とに とに success た.

项目成果

H.Terada et al.: "Important role of loops in the transport activity of the mitochondrial ADP/ATP carrier" Progr.Colloid Polym.Sci.901. 192-197 (1997)

H.Terada 等人：“环在线粒体 ADP/ATP 载体转运活性中的重要作用”Progr.Colloid Polym.Sci.901。

E.Majima et al.: "Binding of the fluorescein derivative Eosin Y to the mitochondrial ADP/ATP carrier : Characterization of the adenine nucleotide binding site" Biochemistry. 37. 424-432 (1998)

E.Majima 等人：“荧光素衍生物曙红 Y 与线粒体 ADP/ATP 载体的结合：腺嘌呤核苷酸结合位点的表征”生物化学。