核膜孔複合体蛋白質nup153の構造と機能

核孔复合蛋白nup153的结构和功能

• 批准号: 09263202
• 负责人: 助川 淳
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09263202/
• 关键词: 核膜孔複合体; nup153; Znフィンガー

nup153は真核細胞の核膜孔複合体(Nuclear Pore Complex:NPC)の核質側周辺構造である″核バスケット″の構成蛋白質として知られている。本研究者が同定したこの分子量153kDの蛋白質は、4つのZnフィンガー様構造を持ち、in vitroでDNAを良く結合する。そのため、以前から存在が予想されていたNPCのDNA結合サブユニットである可能性が考えられた。核と細胞質間の選択的物質輸送を制御しているNPCが、また一方で、その核質側において細胞のゲノムDNAと結合し、核内クロマチンの三次元構造を規定する要素の一つとして機能しているのではないかという仮説に基づき、本研究ではnup153のZnフィンガー様構造の持つDNA結合活性の塩基配列特異性について検討した。大腸菌で産生し、精製したnup153(ラット)のZnフィンガードメインと、平均長300bp程度に断片化したラットゲノムDNAをin vitroで反応させ、nup153に対する抗体で共沈降したDNAをPCR法にて増幅した。この操作を繰り返し濃縮されたDNAは、特定の塩基配列に由来する短い反復塩基配列(マイクロサテライト配列)であった。さらに解析したところ、nup153のZnフィンガー様構造は、in vitroにおいて、このマイクロサテライトDNAの作る高次構造に強い親和性を持つことが明らかになった。このDNAの高次構造はin vitroにおいて形成されるものであるが、細胞内に実際にそのようなDNAの高次構造が存在するか否かについては報告がなく、現在さらに検討中である。

Nup153 is a Nuclear cytoplasmic structure of nuclear pore complex (NPC) in eukaryotes. The researchers identified a protein with a molecular weight of 153kD, a protein with a molecular weight of 4 kD, and a protein with a molecular weight of 153 kD. The possibility of NPC DNA binding is examined. In this study, we investigated the molecular structure and DNA binding activity of Zn ~(2 +)~(3 +) Escherichia coli was produced, purified, and DNA fragments with an average length of 300bp were amplified by PCR. This operation is to concentrate the DNA, and to determine the origin of the specific nucleotide sequence. In addition, the structure of Zn ~(2 +) The higher order structure of DNA is formed in vitro, and the higher order structure of DNA exists in cells.