哺乳動物精子形成細胞の分化と死の調節機構の解析

哺乳动物生精细胞分化和死亡调控机制分析

• 批准号: 09264209
• 负责人: 中西 義信
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09264209/
• 关键词: 精子形成; 細胞培養; アポトーシス; 貧食; 細胞接着因子

哺乳動物の精子形成細胞はセルトリ細胞と密に接触しており、この接触が精子分化に必要だと考えられる。また、精子形成細胞の7割以上が精子に成熟する前にアポトーシスを起こし、セルトリ細胞に貧食されると予想されている。これまで研究代表者は、セルトリ細胞による貧食が精子形成細胞表層に露出するホスファチジルセリン(PS)に依存することを示し、また精子形成細胞とセルトリ細胞との接着アッセイを確立した。この研究では、セルトリ細胞のPS受容体および接着因子の同定を行った。1)精子形成細胞の貧食を誘導するセルトリ細胞PSレセプターの同定食細胞におけるPSレセプターの候補であるクラスBスカベンジャーレセプタータイプI(SR-BI)のmRNAがセルトリ細胞に存在することがわかったので、ラットセルトリ細胞から作製したライブラリーよりSR-BIcDNAをクローニングした。このcDNAをセルトリ細胞由来の培養細胞株に導入したところ、PSリポソームへの結合活性およびPS依存的な精子形成細胞の貧食活性がともに増大した。よって、SR-BIは貧食を誘導するセルトリ細胞のPSレセプターであることが示唆された。2)精子形成細胞とセルトリ細胞の接触を規定する細胞接着因子の同定セルトリ細胞への接着活性を指標とした発現クローニングにより、ラット精子形成細胞に存在する接着因子のcDNA候補を得た。このcDNAはアクロソームに存在するTpx-1と呼ばれる蛋白質のラットホモローグをコードしていた。ラットTpx-1は243アミノ酸残基から成り、N末側にシグナルペプチド、C末側にCysに富む配列を有していた。セルトリ細胞への接着活性には、シグナルペプチドを含むN末側102個のアミノ酸で十分でありCysに富む領域は必要ではなかった。以上の結果より、Tpx-1が両細胞の接触を規定する接着因子であることが示唆された。

Mammalian sperm formation cells are closely related to sperm differentiation. In addition, sperm formation cells of more than 7 times before sperm maturation, such as sperm cells, sperm cells The study was conducted on behalf of the study group, and the results showed that the sperm cells in the study group were dependent on the surface layer of the sperm cells. This study was conducted to determine the identity of PS receptors and adhesion factors in cells. 1)The expression of mRNA of the PS gene in sperm forming cells is induced by the presence of the SR-BI cDNA in sperm forming cells. When the cDNA was introduced into cultured cell lines derived from these cells, the binding activity of the PS protein and the oligotrophic activity of the PS-dependent sperm forming cells increased. The expression of SR-BI in the cell line was studied. 2)A cDNA candidate for a binding factor that is present in sperm forming cells is obtained as an indicator of binding activity in sperm forming cells and cells that are in contact with each other. This cDNA is stored in the Tpx-1 and the protein is stored in the Tpx-1. Tpx-1 has 243 amino acid residues, N terminal residues and C terminal residues. The cell adhesion activity of Cys is very high, including 102 amino acids at the end of the cell. The above results indicate that Tpx-1 can regulate cell contact, and that Tpx-1 can regulate cell contact.

项目成果

S.Nogoe: "Induction of apoptosis in ischemia-reperfusion model of mouse kidnay : possible imvolvement of Fas." J.Am.Soc.Nephrol.(1998)

S.Nogoe：“小鼠肾脏缺血再灌注模型中细胞凋亡的诱导：Fas 可能参与其中。”

A.Shcratsuchi: "Recognitoar of phas phatibilsenine on the surface of popototic spermatogenic cells and subsequent phagocytosis by Sutdi cells of the rat." J.Biol.Chem.272. 2354-2358 (1997)

A.Shcratsuchi：“识别凋亡的生精细胞表面的 phatibilsenine，并随后被大鼠 Sutdi 细胞吞噬。”

I.Fujimoto: "Co-erpression of Fas and Fas-ligand on the surface of inflneya virus-imfected cells." Cell Death Diffu.(1998)

I.Fujimoto：“Fas 和 Fas 配体在流感病毒感染细胞表面的共压缩。”