G1期におけるDNA複製因子の発現と活性の制御機構の研究

G1期DNA复制因子表达及活性调控机制研究

• 批准号: 12141201
• 负责人: 大谷 清
• 金额: $ 37.63万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12141201/
• 关键词: DNA複製; 細胞周期; E2F; 標的遺伝子; p27; Jab1; がん; ARF; サブトラクション法; 転写制御; p27Kip1; ディファレンシャルディスプレイ法; サブトラクション; Differential Display法; Subtraction法

増殖刺激からDNA複製開始に至るG1期制御を解析し、以下を明らかにした。1)E2Fの新規標的として、28個の既知遺伝子と8個の機能未知遺伝子を同定した。8個の機能未知遺伝子のうち5個の遺伝子の発現がDNA複製開始に必要であった。2)E2FによるARF遺伝子の特異な発現制御機序を解析し、サイクリン依存性キナーゼ(Cdk)によるリン酸化を介さずにpRBが不活性化されるとE2FがARF遺伝子の非典型的なE2F結合配列に結合し遺伝子発現を活性化することを明らかにした。3)テロメアの正常な機能の維持に重要なテロメラーゼ遺伝子発現が、ヒトT細胞においてG1/S移行期に活性化されることを見出した。その制御に重要なエレメントとそこに特異的に結合する細胞性因子を同定した。4)膵臓癌と肺癌においてJab1の発現が亢進し、それに伴ってCdk inhibitor p27の発現の低下や癌が悪性化している所見を得た。5)Jab1遺伝子座に変異を導入したマウスを作製し解析を行った結果、Jab1ノックアウトマウスは胎生致死で、cyclin E, tumor suppressor p53, Cdk inhibitor p27の発現が向上し、細胞増殖が抑えられ、アポトーシスが亢進すること、Jab1ヘテロ細胞はp27の発現上昇を伴ってS期への進行が遅くなることを見いだした。6)慢性骨髄性白血病(CML)において、原因遺伝子産物Bcr-Ablの下流でJab1が働きp27分解を促進することを見いだした。この反応経路ではRas/MAPKおよびPI3Kシグナル伝達系を介しており、CML発症に繋がる細胞増殖の一因となることを明らかにした。7)マウス線維芽細胞でJab1が細胞接着かつ細胞周期依存的に制御されること、さらに、rasによりトランスフォームした細胞ではこの制御がなくなっていることを見いだした。

Proliferative stimulation らDNA replication begins に to るG1 phase control を analysis た, the following を is ら ら に た た た. 1) The new regulations of E2F <s:1> target と て, 28 known relics 伝 と, 8 relics of unknown functions 伝 を and fixed た. Eight <s:1> sub-enzymes with unknown functions うち five 伝 sub-enzymes exhibit がDNA replication begins に necessary であった. 2) E2F に よ る ARF heritage 伝 son の specific な 発 now royal machine sequence analytical し を, サ イ ク リ ン dependency キ ナ ー ゼ (Cdk) に よ る リ ン acidification を interface さ ず に lm-prb が not activeness さ れ る と E2F が ARF but 伝 son の atypical な E2F combining with column に し posthumous son 伝 発 now を activeness す る こ と を Ming ら か に し た. 3) テ ロ メ ア の の な function to maintain normal に important な テ ロ メ ラ ー ゼ heritage 伝 発 が now, ヒ ト t-cell に お い て G1 / S transition period に activeness さ れ る こ と を shows し た. Important な そ の suppression に エ レ メ ン ト と そ こ に specific に combining す る cell sex factor を with fixed し た. 4) Cui viscera と lung cancer に お い て Jab1 の 発 now が hyperthyroidism し, そ れ に with っ て Cdk inhibitor p27 の 発 now low の や carcinoma が 悪 sexualising し て い る seen を た. 5) Jab1 heritage 伝 stroma に - different を import し た マ ウ ス を cropping し parsing line を っ た results, Jab1 ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス は viviparous death で, cyclin E, tumor suppressor p53. Cdk inhibitor p27 の 発 が し, cell raised up now reside が え suppression ら れ, ア ポ ト ー シ ス が hyperthyroidism す る こ と, Jab1 ヘ テ ロ cells は p27 の 発 now rising を with っ て S period へ の for が 遅 く な る こ と を see い だ し た. 6) chronic bone marrow leukemia (CML) に お い て, reason but the latter's 伝 Bcr - Abl の obscene で Jab1 が 働 き p27 decomposition を promote す る こ と を see い だ し た. こ の anti 応 経 road で は Ras/MAPK お よ び PI3K シ グ ナ ル 伝 da system を interface し て お り, CML 発 に 繋 が る cells raised colonization の due to と な る こ と を Ming ら か に し た. 7) マ ウ ス line d bud cells で Jab1 が cells then か つ cell cycle dependent に suppression さ れ る こ と, さ ら に, ras に よ り ト ラ ン ス フ ォ ー ム し た cells で は こ の suppression が な く な っ て い る こ と を see い だ し た.

项目成果

Cell type-specific E2F activation and cell cycle progression induced by the oncogene product Tax of human T-cell leukemia virus type I

• DOI: 10.1074/jbc.275.15.11154
• 发表时间: 2000-04-14
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Ohtani, K;Iwanaga, R;Nakamura, M
• 通讯作者: Nakamura, M

Molecular mechanism of cell cycle progression induced by the oncogene product Tax of human T-cell leukemia virus type I

• DOI: 10.1038/sj.onc.1204304
• 发表时间: 2001-04-19
• 期刊: ONCOGENE
• 影响因子: 8
• 作者: Iwanaga, R;Ohtani, K;Nakamura, M
• 通讯作者: Nakamura, M

Requirement of cell growth for gene expression induced by the lactose and tetracyclin repressor-operator combination system in a human T-cell line.

人 T 细胞系中乳糖和四环素阻遏物-操纵子组合系统诱导的细胞生长对基因表达的要求。

• 发表时间: 2000
• 期刊: Biochem.Biophys.Res.Commun. 276
• 作者: Iwanaga;R. et al.
• 通讯作者: R. et al.

Iwanaga, R.et al.: "Molecular mechanism of cell cycle progression induced by the oncogene product Tax of human T-cell leukemia virus type I."Oncogene. 20. 2055-2067 (2001)

Iwanaga, R.等人：“人类 T 细胞白血病病毒 I 型致癌基因产物 Tax 诱导细胞周期进展的分子机制。”Oncogene。

Sugihara, T. et al.: "Pex19p dampens the p19ARF-p53-p21WAF1 tumor suppressor pathway"J. Biol. Chem.. 276. 18649-18652 (2001)

Sugihara, T. 等人：“Pex19p 抑制 p19ARF-p53-p21WAF1 肿瘤抑制通路”J.