脊髄視床路ニューロン興奮性増強に関与するNMDA受容体型の同定とその修飾機構

脊髓丘脑束神经元兴奋性增强涉及的NMDA受体类型鉴定及其修饰机制

基本信息

  • 批准号:
    13041063
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.56万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 财政年份:
    2001
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2001 至 2002
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

ラット(生後2週齢)の視床VPL核に、麻酔下において蛍光ラテックスビーズの注入手術を行った。その数日後、腰部脊髄のスライス標本(厚さ400ミクロン)を作製し、逆行性に標識されたスライス内の脊髄視床路(STT)ニューロンを、蛍光顕微鏡下に同定した。主として深部後角に分布するSTTニューロンからパッチクランプ記録を行った。従来、麻酔下ラット脊髄からの細胞外記録法によって報告されているwind-up現象、すなわち痛み信号を伝達するC線維の低頻度繰り返し刺激によって脊髄ニューロンの興奮性が漸増する現象が、スライス標本の痛み信号出力ニューロンであるSTTニューロンにおいて、再現するか否かを、第一に検討した。灌流液中に抑制性伝達物質受容体チャネルのブロッカーを投与した条件下で、興奮性シナプス入力のみを薬理学的に単離し、細胞外通電で刺激した。この際にSTTニューロンに誘発される活動電位を、セルアタッチト法による細胞外記録法または、ホールセル法による細胞内記録法によって検出し、その頻度や時間的パターンの解析を行った。1)約半数のSTTニューロンにおいて、低頻度(0.03-0.1Hz)刺激により、誘発される活動電位スパイク個数が時間とともに増加する例が認められた。これらのニューロンにおいては、刺激1発あたりのスパイク個数は、刺激開始時に比べwind-up後では平均3倍以上に増加した。2)スパイク個数の増加が定常状態に達した後、NMDA受容体の選択的ブロッカーであるAP5(100μM)を灌流液中に投与すると、スパイク個数は刺激開始時と同じ程度にまで減少した。以上の結果は、スライス標本中のSTTニューロンの一部においてもwind-up現象が出現し、それにはNMDA受容体が関与していることを初めて示したものである。
The VPL nucleus of the optic bed (2 weeks after birth) was injected into the optic bed. A few days later, the lumbar spine was identified by the spinal cord (thickness: 400 mm), and the spinal cord was identified by the retrograde optic pathway (STT). The distribution of the main and deep posterior angles of the STT was recorded. Extracellular recording method for the detection of wind-up phenomenon, pain signal transmission, low frequency of C-ray dimension, gradual increase of excitability of stimulus, pain signal output, STT, reproduction, etc. The inhibitory substances in the perfusate are stimulated by the presence of an excitatory substance in the perfusate and by the presence of an extracellular current This time, STT can induce the activity potential, the frequency, and the time of the extracellular recording method, and the intracellular recording method. 1)About half of the STT responses were induced by low frequency (0.03-0.1Hz) stimuli. The number of the first stimulus was 3 times higher than that of the second stimulus. 2) The number of NMDA receptors increased to a steady state, and the number of NMDA receptors decreased to the same extent as the number of AP5 (100μM) administered to the perfusate. As a result, the phenomenon of wind-up appeared in part of STT, and NMDA receptor was related to STT.

项目成果

期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
A.Momiyama et al.: "The density of AMPA receptors activated by a transmitter quantum at the climbing fibre-Purkinje cell synapse in immature rats"The Journal of Physiology. (発売予定). (2003)
A.Momiyama 等人:“未成熟大鼠攀爬纤维浦肯野细胞突触处的 AMPA 受体激活的密度”《生理学杂志》(2003 年)。
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