ショウジョウバエ機能獲得変異体を用いた新規糖鎖遺伝子の探索と機能の解明

使用果蝇功能获得突变体寻找新的聚糖基因并阐明其功能

• 批准号: 14011204
• 负责人: 豊田 英尚
• 金额: $ 3.07万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14011204/
• 关键词: 遺伝子; ショウジョウバエ; グリコサミノグリカン; ヘパラン硫酸; 糖鎖

Wnt/Wingless, TGF-β/Dpp, Hedgehog, FGFなどの細胞間シグナル伝達物質がヘパラン硫酸によって制御されていることがショウジョウバエを使って示され,糖鎖の重要性が再認識されている.そこで,ショウジョウバエ機能獲得変異体の糖鎖分析による糖鎖関連遺伝子の検索法を検討し,新たに発見した遺伝子の機能解明を試みた.本研究ではまず,遺伝子検索に用いるための蛍光ポストカラムHPLCによる高感度な単糖組成分析法を確立した.その結果,アミノ糖の構成比の変化を惹起する二つの新規遺伝子,unbalanced amino sugars-1,2 (unbas-1,2)を見出すことに成功した.unbas-1はムチン型糖鎖の,unbas-2はN-結合型糖鎖の発現に関連した新しいタイプの糖鎖関連遺伝子であった.unbas-1は種の壁を越えてよく保存されており,ヒト,マウス,線虫に非常に高い相同性をもつ遺伝子が存在した.また,unbas-1の強制発現によってムチン型糖鎖を持つ複数の糖タンパク質の発現量が増加し,非還元末端にGalα残基を有する糖鎖の存在が確認された.さらにアミノ酸配列から,Unbas-1はレセプター用の立体構造を有していることが予想され,新しい創薬研究ターゲットになるものと思われた.本研究で展開されたショウジョウバエを用いる糖鎖機能解析の試みが,糖転移酵素をコードする遺伝子を対象とした従来の研究では得られない,糖鎖生物学上の新発見への糸口となることが期待される.

Wnt/Wingless, TGF-β/Dpp, Hedgehog FGF な ど の intercellular シ グ ナ ル 伝 of material が ヘ パ ラ ン sulfate に よ っ て suppression さ れ て い る こ と が シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ を make っ て in さ れ, sugar lock の importance が reinterprets さ れ て い る. そ こ で, シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ analysis - foreign の sugar lock function に よ る sugar lock masato even heritage 伝 son の 検 rope method を 検 for し, new た に 発 see し た To explain the function of 伝, try を. This study で は ま ず, but son 伝 検 cable に with い る た め の 蛍 light ポ ス ト カ ラ ム HPLC に よ る Gao Gan degrees な 単 sugar composition analysis を establish し た. そ の results, ア ミ ノ の sugar composition than の variations change を provoked す る two つ の new rules have 伝 son, unbalanced amino sugars - 1, 2 Out (unbas - 1, 2) を す こ と に successful し た. Unbas - 1 は ム チ sugar lock の ン type, type 2 は unbas - N - combined with sugar lock の 発 now に masato even し た new し い タ イ プ の sugar lock masato even heritage 伝 son で あ っ た. は unbas - 1 kind of の wall を more え て よ く save さ れ て お り, ヒ ト, マ ウ ス, nematode に に high very much い identity を も つ posthumous son 伝 が exist し た. ま た, の unbas - 1 mandatory 発 now に よ っ て ム チ ン type lock を hold つ plural の sugar sugar タ ン パ ク qualitative の 発 quantity が raised し requirement by now, the end of the yuan also に Gal alpha residues を have す る sugar lock の exist が confirm さ れ た. さ ら に ア ミ ノ acid with column か ら, unbas - 1 は レ セ プ タ ー の three-dimensional structure Build を have し て い る こ と が to think さ れ, new し い gen 薬 research タ ー ゲ ッ ト に な る も の と think わ れ た. で launched this study さ れ た シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ を with い る candy lock function analytical の try み が, planning to move sugar enzyme を コ ー ド す る posthumous son 伝 を like と seaborne し た 従 research で の は have ら れ な い, sugar lock biological の new 発 see へ の si mouth と な る こ と が expect さ れ る.

项目成果

T.Imanari, T.Toida, I.Koshiishi, H.Toyoda: ""HPLC analysis of oligosaccharides derived from glycosaminoglycans in biological materials."In"Carbohydrate Analysis", PP.387-402."Elsevier Science (Amsterdam). 1223 (2002)

T.Imanari、T.Toida、I.Koshiishi、H.Toyoda：“生物材料中源自糖胺聚糖的寡糖的 HPLC 分析”。“碳水化合物分析”，PP.387-402。“Elsevier Science（阿姆斯特丹）。

E.Pfeiler, H.Toyoda, M.D.Williams, R.A.Nieman: "Identification, structural analysis and function of hyaluronan in developing fish larvae (leptocephali)"Comparative Biochemistry and Physiology part B. 132. 443-451 (2002)

E.Pfeiler、H.Toyoda、M.D.Williams、R.A.Nieman：“透明质酸在鱼类幼虫（细头鱼）发育中的鉴定、结构分析和功能”比较生物化学和生理学部分 B. 132. 443-451 (2002)

S.Sakai, J.Onose, H.Nakamura, H.Toyoda, T.Toida, T.Imanari, RJ.Linhardt: "Pretreatment procedure for the microdetermination of chondroitin sulfate in plasma and urine"Analytical Biochemistry. 302. 169-174 (2002)

S.Sakai、J.Onose、H.Nakamura、H.Toyoda、T.Toida、T.Imanari、RJ.Linhardt：“血浆和尿液中硫酸软骨素微量测定的预处理程序”分析生物化学。

S.Sakai, H.Akiyama, N.Harikai, H.Toyoda, T.Toida, T.Maitani, T.Imanari: "Effect of chondroitin sulfate on murine splenocytes sensitized with ovalbumin"Immunology Letters. 84. 211-216 (2002)

S.Sakai、H.Akiyama、N.Harikai、H.Toyoda、T.Toida、T.Maitani、T.Imanari：“硫酸软骨素对卵清蛋白致敏的小鼠脾细胞的影响”免疫学快报。

A.Chaidedgumjorn, A.Suzuki, H.Toyoda, T.Toida, T.Imanari, R.J.Linhardt: "Conductivity detection for molecular mass estimation of per-Ο-sulfonated glycosaminoglycans separated by high-performance size-exclusion chromatography"Journal of Chromatography A. 9

A.Chaidedgumjorn、A.Suzuki、H.Toyoda、T.Toida、T.Imanari、R.J.Linhardt：“电导率检测用于通过高性能尺寸排阻色谱法分离的全磺化糖胺聚糖的分子质量估计”《色谱杂志》 A.9