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枯草菌と大腸菌におけるトランス・トランスレーションの標的タンパク質の解析

枯草芽孢杆菌和大肠杆菌中反式翻译靶蛋白的分析

基本信息

批准号：
14014201
负责人：
姫野俵太
金额：
$ 3.65万
依托单位：
Hirosaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

まず、トランストランスレーション産物を特異的に検出、単離するシステムを開発した。この方法を用いて枯草菌のtmRNAが仲介するトランストランスレーションの標的タンパク質のいくつかを同定した。それらの中にはストレス応答遺伝子産物(PerR)、カタボライト抑制を受ける遺伝子産物(TreP)など興味深いものが含まれていた。CcpAが介在するカタボライト抑制にトランストランスレーションが関与する可能性が示唆され、新たな生理的機能が明らかになりつつある。TreP-非分解型タグペプチド融合タンパク質は、いくつかのプロテアーゼで消化した後、それらのC末端断片をニッケルカラムを用いて精製し、MALDI TOF MASSを用いてアミノ酸配列を解析し、TrePのどの部分からタグペプチドに置き換わっているのかを明らかにした。また、全体として高温のときほど、トランストランスレーションが盛んに起こっていることが明らかになった。一方、大腸菌のトランストランスレーションの標的タンパク質についてもそのいくつかを明らかにすることができた。現在トランストランスレーション反応産物の詳しい解析を行っており、それを通して、いつ、どのようなときに、何のためにトランストランスレーションが起こるのかという点を明らかにしていきたい。

The product is unique in appearance and appearance. The method uses the tmRNA of Bacillus subtilis to mediate and determine the quality of the target. In addition, the production of PerR, TreP and other products is also very interesting. CcpA has the possibility of indicating new physiological functions in the medium of inhibition. TreP-non-decomposable type of fusion protein is purified after digestion, C-terminal fragment is purified, MALDI TOF MASS is used for acid alignment analysis, TreP-part of the fusion protein is purified after digestion. The temperature of the whole body is high, and the temperature of the whole body is high. A party, large intestine bacteria and other factors of the standard of the quality of the product. Now, the detailed analysis of the product is carried out, and it is clear that the product has been opened, closed, closed, and opened.