翻訳反応におけるRNAヘリケースA/ウイルスmRNA複合体の生物学的意義の解明

阐明 RNA 解旋酶 A/病毒 mRNA 复合物在翻译反应中的生物学意义

• 批准号: 14021123
• 负责人: 藤井 亮爾
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: St. Marianna University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14021123/
• 关键词: 遺伝子; HIV; 核酸; 感染症; 発現制御; RNAヘリケースA; 転写統合装置; ウイルス

当研究室では、RNAヘリケースA(RHA)/転写統合装置CBP複合体の研究を一貫して行っている。その過程において、RHAがHIV-1のTARと呼ばれるRNA高次構造に結合し、その遺伝子発現に重要な役割を果たしていることを証明した。またRHAは核と細胞質を行き来するが、RHAの核移行能欠失変異体(RHA _<K1163A>)は細胞質に局在する。つまりRHA _<K1163A>は核内で作用できないが、それにもかかわらずTAR RNAの相補領域を含むHIV-1 LTRからの遺伝子発現を活性化した。この実験結果は、TAR RNA依存的なRHAの細胞質における作用点の存在を示す。そこで本研究では、「TAR RNA-RHA複合体の細胞質における生物学的意義を明らかにする。」ことを目的とした。まず細胞質に局在するRHA _<K1163A>が遺伝子発現のどのステップで作用しているかについて調べるため、ノーザンブロット法によりmRNAの定量を行った。その結果、RHA _<K1163A>の活性化効果は、翻訳反応の活性化ではなく、mRNA量によって規定されていることが明らかとなった。mRNA量増加の原因として、「転写量の増加」と「mRNAの分解抑制」の2つの可能性が考えられる。後者の可能性についてはmRHAの半減期への影響を検討中であるが、野生型RHA、RHA _<K1163A>はともに半減期を延長した。前者の可能性については核Run Onアッセイにより検討中である。ヘリケースであるRHAには、やはりRNAシャペロンとしての機能が備わっており、mRHAの半減期を延ばし、結果的に遺伝子発現を活性化していると思われる。HIVがわざわざ一度、宿主染色体上へ組み込まれるのは、このRNAシャペロンとしてのRHAを利用することがその理由の1つかもしれない。

When the research laboratory was established, the research on RNA synthesis A(RHA)/CBP complex was carried out consistently. This is evidence of the importance of RNA higher-order structures in the development of HIV-1 and HIV-1 genes. Also, RHA exists between the nucleus and the cytoplasm, and RHA's nuclear migration protein (RHA _<K1163A>) exists in the cytoplasm. RHA _<K1163A>is active in the complementary domain of TAR RNA, including HIV-1 LTR. These results indicate the existence of a TAR RNA-dependent cytoplasmic action site for RHA. This study is entitled "Clarifying the biological significance of TAR RNA-RHA complex in cytoplasm." The goal is to The expression of RHA _<K1163A>mRNA in the cytoplasm of the cells was determined by the method of quantitative analysis. As a result, RHA _<K1163A>activation results, reverse transcription and mRNA expression are regulated. The reasons for the increase of mRNA content, the increase of mRNA content and the inhibition of mRNA decomposition are examined. The possibility of the latter is discussed in the study of the effect of mRHA on the half-life of wild type RHA and RHA<K1163A>. The former possibility is not the core of the Run On the loss of information. RHA is active in the development of RNA and its functions. HIV infection is caused by the presence of a host chromosome, RNA, and RHA.

项目成果

H.Fujita: "Opposite effects of MBD2a on gene regulation"Molecular and Cellular Biology. (in press). (2003)

H.Fujita：“MBD2a 对基因调控的相反作用”分子和细胞生物学。

T.Hirose: "Regulation of CREB-mediated transcription by association of CDK4 binding protein p34 SEI-1 with CBP"International Journal of Molecular Medicine. (in press). (2003)

T.Hirose：“通过 CDK4 结合蛋白 p34 SEI-1 与 CBP 的关联调节 CREB ​​介导的转录”国际分子医学杂志。

T.Imaizumi: "Retinoic Acid-Inducible Gene-I Is Induced in Endothelial Cells by LPS and Regulates Expression of COX-2"Biochemical and Biophysical Research Communications. 292. 274-279 (2002)

T.Imaizumi：“视黄酸诱导基因-I 在内皮细胞中被 LPS 诱导并调节 COX-2 的表达”生物化学和生物物理研究通讯。

S.Aratani: "Aromatic residues are required for RNA helicase A mediated transactivation"International Journal of Molecular Medicine. (in press). (2003)

S.Aratani：“RNA 解旋酶 A 介导的反式激活需要芳香族残基”国际分子医学杂志。

M.Nakazawa: "TNF α induces acetylation of p53 but attenuates its transcriptional activation in rheumatoid synoviocytes"International Journal of Molecular Medicine. 10. 269-275 (2002)

M. Nakazawa：“TNF α 诱导 p53 乙酰化，但减弱其在类风湿性滑膜细胞中的转录激活”，《国际分子医学杂志》10. 269-275 (2002)。