活性型低酸素応答性転写因子HIF-1α遺伝子導入マウスの作製および解析

主动缺氧反应转录因子HIF-1α转基因小鼠的产生和分析

• 批准号: 14028043
• 负责人: 谷本 圭司
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14028043/
• 关键词: hypoxia; hypoxia-inducible factor; angiogenesis; genetic polymorphism; transgenic mice; transcription factor; head and neck cancer; tumor-stroma

hypoxia-inducible factor-1 (HIF-1)は低酸素刺激に応答する転写因子で,癌組織においても重要な役割を果たしていると考えられる。本申請は,ヒトで見出された遺伝子型のHIF-1α(活性型HIF-1α)を遺伝子導入したマウスを作製し,癌の増殖・進展および転移能に与える遺伝子型の影響を明らかにすることを目的とする。ヒト口腔扁平上皮癌検体を用いた解析の結果,P582SまたはA588Tのどちらかの遺伝子アリールを持つ患者(ヘテロ型)の腫瘍は,WT(ホモ型)のそれよりも有意に多くの腫瘍内血管を持つこと,さらに初診時腫瘍径が大きいことを見いだし,HIF-1α遺伝子の転写活性化能に違いが認められる遺伝子多型が腫瘍の増殖や進展に関与する可能性が示された(投稿中)。現在,CMVプロモーターを用いた,FLAG標識ヒトHIF-1α野性型(WT)またはアミノ酸置換型(P582SおよびA588T)遺伝子発現ベクター導入BALB/cマウスを作製中(genotyping)である。また,腫瘍移植実験に用いるため,FLAGのみ,FLAG HIF-1αWT,またはP582S, A588Tの計4種類の発現ベクターをMMSV-BALB/3T3細胞に安定遺伝子導入した。今後,異なる遺伝子型腫瘍の移植実験等により,腫瘍-間質間相互作用の役割等,癌の増殖・進展および転移能について検討する予定である。

低氧诱导因子-1（HIF-1）是对低氧刺激反应的转录因子，被认为在癌症组织中起重要作用。该应用旨在产生用人类发现的基因型HIF-1α（活性HIF-1α）转染的小鼠，并阐明基因型对癌症增殖，进展和转移性潜力的影响。使用人口腔鳞状细胞癌标本的分析表明，p582s或A588T（异型）基因芳基（异型型）患者的肿瘤具有明显的肿瘤内血管（同型）（同型）的肿瘤内血管，而肿瘤直径与初次咨询的肿瘤直径更大，表明在基因范围的范围差异化剂量的遗传学差异，该剂量均具有 - 构成晶体的细胞构成，即构成晶体的晶体构成，构成了造成剂量的晶状体术语。可能参与肿瘤生长和发育（邮政）。目前，使用CMV启动子生产BALB/C小鼠，这些启动子被标记为标记的人HIF-1α野生型（WT）或氨基酸取代（p582s和A588T）基因表达向量。此外，用于用于肿瘤移植实验，四个表达向量，仅FLAG，FLAG HIF-1αWT或P582和A588T，稳定地转移到MMSV-BALB/3T3细胞中。将来，我们计划通过不同基因型肿瘤的移植实验来研究肿瘤 - 细胞瘤交往的作用，以及癌症和转移潜力的生长和进展。

项目成果

Teresa Pereira: "Identification of Residues Critical for Regulation of Protein Stability and the Transactivation Function of the Hypoxia-Inducible Factor-1α by the von Hippel-Lindau Tumor Suppresor Gene Product"Journal of Biological Chemistry. 278. 6816-6

Teresa Pereira：“通过 von Hippel-Lindau 肿瘤抑制基因产物鉴定对调节蛋白质稳定性和缺氧诱导因子 1α 反式激活功能至关重要的残基”生物化学杂志 278. 6816-6。

Ryo Okamoto: "Unique action determinants of double acting topoisomerase inhibitor, TAS-103"International Journal of Oncology. 19. 921-927 (2002)

Ryo Okamoto：“双效拓扑异构酶抑制剂 TAS-103 的独特作用决定因素”国际肿瘤学杂志。

Kazuko Miyazaki: "Identification of Functional Hypoxia Response Elements in Promoter Region of the DEC1 and DEC2 Gene"Journal of Biological Chemistry. 277. 47014-47121 (2002)

Kazuko Miyazaki：“DEC1和DEC2基因启动子区功能性缺氧反应元件的鉴定”生物化学杂志。

Ryo Okamoto: "O6-methylguanine-DNA methyltransferase (MGMT)as a determinant of resistance to camptothecin derivatvies"Japanese Journal of Cancer Research. 93. 93-102 (2002)

Ryo Okamoto：“O6-甲基鸟嘌呤-DNA 甲基转移酶 (MGMT) 作为喜树碱衍生物耐药性的决定因素”《日本癌症研究杂志》。

Ken Hirao: "Targeted gene delivery to human osteosarcoma cells with magnetic liposomes under a magnetic field"International Journal of Oncology. (in press). (2003)

Ken Hirao：“在磁场下用磁性脂质体将基因靶向递送至人骨肉瘤细胞”《国际肿瘤学杂志》。