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下等脊索動物からみた脊索動物の基本的な発生システムとその変化

从下等脊索动物的角度看脊索动物的基本发育系统及其变化

基本信息

批准号：
14034249
负责人：
西駕秀俊
金额：
$ 4.35万
依托单位：
Tokyo Metropolitan University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14034249/
关键词：
脊索動物軸形成ホヤ遺伝子 otx snail Hox FISH ナメクジウオ Zic lim

项目摘要

1)マボヤのotx遺伝子Hrothの機能を、モルフォリノオリゴヌクレオチド(MO)を用いた翻訳阻害実験により解析した。その結果、Hrothの機能は、脳胞となるべき領域が形成された後の分化に必須であるが、脳胞領域の形成には必要とされないことが分かった。我々は既に、脳胞の細胞系譜でのHrothの発現が32細胞期までに起こる植物半球からのシグナリングに依存していることを示してきた。今回植物半球の内胚葉系譜におけるHrothの発現は、このシグナリングに直接的に関係しないことを明らかにした。前方内胚葉におけるotxの役割について、ホヤと脊椎動物で異なる可能性が示唆された。2)マボヤのotx遺伝子Hrothの空間的発現の制御機構の解析:Hrothの翻訳開始点の上流約4kbpを含むlacZレポーターコンストラクトをマボヤ受精卵に顕微注入し、卵割期でlacZの発現を調べた結果、上流約4kbpの領域は、卵割期から尾芽胚期のHrothの転写を再現することが分かった。さらにそれぞれ異なった細胞系譜に特異的に転写を司る6つの転写調節領域と、細胞系譜特異的転写を司る転写因子の候補を同定した。3)我々は既にマボヤのSnail遺伝子Hrsnaを単離し、その発生過程における発現パターンについて報告してきた(Wada and Saiga (1999) Develop. Growth Differ 41,9-18)。今年度、西田研との共同研究で、Hrsnaは脊索の発生運命を抑制すること、このことが間充織細胞から脊索への運命を排除し、間充織細胞としての発生運命の確立に働くことが明らかにされた。4)Hox遺伝子のクラスター構造とメンバー遺伝子の発現とのコリニアリティがホヤではどの程度保存されているのかを知る目的で、カタユウレイボヤ卵割期胚細胞を用いたFISHの方法を確立した(佐藤研、西方研との共同研究)。

1) use the otx to check the Hroth machine, and use the flip block (MO) to analyze the data. The result of the experiment, the results of the Hroth test, the differentiation of the cell cycle after the formation of the cell field, and the cell field of the cell, it is necessary for the cell to be divided into two parts. The Hroth of the cell line shows that the 32-cell phase begins in the hemispheric region of the plant. This time, the endodermis of the plant hemispheres are known to be Hroth, so that they can be seen directly. In front of the endodermis, the otx is used to cut the vertebrae. The possibility of cutting the vertebrae indicates the possibility. 2) the analysis of the current control mechanism of the otx sub-Hroth space: the upstream of the starting point of the Hroth flip contains the microinjection of the fertilized eggs, the results of the lacZ cycles during the egg cutting period, the upstream of the 4kbp domain, the tail germ stage and the tail germ stage of the egg cutting period. Please tell me how to write the writing factor of the cell system, which is the same as that of the cell system. 3) We do not know that the Snail will be separated from the Hrsna, and that the health process will lead to a poor performance of the report (Wada and Saiga (1999) Develop. Growth Differ 41 (9-18). This year, Nishida Research Institute Co-Research Institute, Hrsna Spinal Cord Research Institute, Nishida Research Institute, Nishida 4) Hox was used to make sure that the embryos were confirmed by FISH method (joint study by Sato and Western researchers).