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ヒメツリガネゴケとシロイヌナズナで体軸形成開始点としての不等分裂分子機構の解明

阐明立碗藓和拟南芥中不等分裂作为体轴形成起点的分子机制

基本信息

批准号：
14036229
负责人：
長谷部光泰
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Okazaki National Research Institutes
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

(1)ツリガネゴケの約1万5千遺伝子のカタログの中から、代謝、光合成など極性分裂には直接関わりが無いであろうと予想される遺伝子をのぞき、約4000遺伝子を選択した。これらを順次、ヒメツリガネゴケ過剰発現ベクターにサブクローニングし、ヒメツリガネゴケの頂端分裂細胞由来プロトプラストに形質転換し、不等分裂異常をおこす遺伝子を探索している。これまでに約2500のサブクローンが終わり、約1700遺伝子についての形質転換実験を行った。その結果、約100遺伝子が不等分裂に異常を引き起こすことがわかった。これらの中には、不等分裂が等分裂になるもの、分裂細胞が多数できてしまうもの、不等分裂がおこらず1細胞のまま等方位性を保って大きくなったもの、細胞が細胞分裂無しで伸張し続けるものなど様々な表現型に分類できる機能未知の遺伝子および新規遺伝子が含まれている。(2)ヒメツリガネゴケジーントラップライン約2万ラインのスクリーニングの結果、茎頂分裂組織特異的に発現している3ラインのトラップ遺伝子の単離に成功した。これらの遺伝子の機能解析を行った。植物特異的キネシンであるAPI1遺伝子は頂端分裂細胞で発現し、細胞分裂間期に核、終期に細胞板に局在することがGFPとの融合タンパク質の発現解析によりわかった。頂端細胞特異的に発現するユビキチン様タンパク質遺伝子yh78、および姉妹遺伝子であるpph27a22の単独および二重遺伝子破壊株の表現型を観察した。その結果、これらの遺伝子は、細胞分裂と細胞極性決定の両方に関わる機能を持っていると予想された。#21遺伝子は140アミノ酸残基からなるタンパク質をコードしており、そのうちの20アミノ酸はシロイヌナズナのオーソログと高度に類似しているが、それ以外の部分はほとんど類似していないことがわかった。

(1) About 15,000 ツリガネゴケののカタログの中から, metabolism, photosynthesis など polar split には Directly close the わりが无いであろうと yu want to される伝子をのぞき, about 4000 伝子を选択した. The order of the dayターにサブクローニングし、ヒメツリガネゴケのThe origin of apical dividing cells is the change of shape and quality of cells, and the abnormality of unequal division is the exploration of apical dividing cells. About 2,500 これまでにのサブクローンがEndわり, about 1,700 缝子についてのmorphous matter転change実験を行った. The results of the その, about 100 remaining pieces of unequal division of the に abnormal を lead きこすことがわかった.これらの中には, unequal division が equal division になるもの, dividing cells が MANY できてしまうもの、unequal division がおこらず1 cell のままisodirectional を宝って大きくなったもの、Cell が Cell division without しで Stretch し続けるものなど様々な table The current type is classified as a できる, the function is unknown, and the function is unknown. (2)ヒメツリガネゴケジーントラップラインabout 20,000ラインのスクリーニングの results , stem top division tissue-specific に発成している3ラインのトラップ缝子の単利にした.これらの缝子の Functional Analysis を行った. Plant-specific キネシンであるAPI1 is responsible for the appearance of apical dividing cells and the nucleus of interphase cell divisions. , end-stage cell plate structure in the GFP and fusion fusion quality の発now analysis によりわかった. Apical cell-specific に発 appear するユビキチン様タンパク缝子yh78, および sister legacy伝子であるpph27a22の単多および二重狠伝子波壊组のphenotypeを観看した.その results, これらの缝子は, cell division and cell polarity determination の両方に关わるFUNCTION をhold っていると yu think された. #21 缝子は140アミノ灋らなるタンパク性をコードしており、そのうちの20アミノ草はシロイしているが、それThe other parts of はほとんど are similar to していないことがわかった.