神経細胞遊走における14-3-3εによるNudelの制御機構の解明

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我々は14-3-3epsilonがNudelと結合することによってNudelの機能発現、ひいては細胞質ダイニンの機能制御に関与していることを明らかにした。更にこれらの過程にはリン酸化・脱リン酸化が重要であることも明らかにした。そこで私はNudelのリン酸化・脱リン酸化の意義を解明するために14-3-3epsilonとの結合に重要なNudel分子内の三ケ所のリン酸化部位(198番目のセリン、219番目のスレオニン、及び231番目のセリン)に対するモノクローナル抗体を作製した。その結果、219番目のスレオニン及び231番目のセリンに対する良好な抗体を得た。得られた抗体のうち特に219番目のスレオニンに対する抗体(N219TP)はマウス脳を用いた免疫組織化学的解析や細胞を用いた蛍光染色法を用いた実験から非常に特異性が高く有用であることがわかった。この抗体を用いてNudelの機能を解析した結果、Nudelの219番目のスレオニンは細胞周期のM期特異的にリン酸化されリン酸化Nudelはぞ紡錘対極に局在することを明らかにした。また、リン酸化Nudelは微小管の剪断に重要なp60カタニンと結合のカタニンの正常な細胞内分布に重要であることがわかった(論文投稿中)。このことは14-3-3epsilon及びNudelがp60カタニンを介して微小管の重合・脱重合を調節し神経細胞の遊走を制御していることを強く示唆するものである。