黄色ブドウ球菌における生体防御攪乱遺伝子の役割について

生物防御破坏基因在金黄色葡萄球菌中的作用

• 批准号: 16017294
• 负责人: 片山 由紀
• 金额: $ 4.86万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16017294/
• 关键词: 黄色ブドウ球菌; ゲノムアイランド; 病原性遺伝子群; in vivo細菌感染マウスのリアルイメージング; ルシフェラーゼ; MHCホモログ遺伝子; CHIPS(Chemotaxic Inhibitory Protein of Staphylococcus aureus); MRSA; CHIPS(Chemotaxis Inhibitory Protein of Staphylococcus aureus)

本研究では、黄色ブドウ球菌で見いだされた、種々の免疫系を攪乱すると予想される遺伝子群と、感染宿主免疫系との相互作用をin vivoで研究し、黄色ブドウ球菌の持つ病原性メカニズムの本質に迫った。1)免疫攪乱遺伝子の機能解析:強毒MRSA株MW2に存在する、感染宿主免疫系に関与すると思われる遺伝子のMHCホモログ遺伝子、エンテロトキシン遺伝子群、接着因子cna(Collagen adhesin)およびCHIPS(Chemotaxis Inhibitory Protein of Staphylococcus aureus)を選択し、それらの機能解析を行った。まずMW2を親株として、各々の遺伝子の欠失変異株、及び過剰発現する変異株を作成した。これらのMW2変異株を用いて、それらの遺伝子がヒトリンパ球の活性化に関与しているのか検討した所、MHCホモログ過剰発現変異株において活性の低下が見られた。このMHCホモログがスーパー抗原によるヒトリンパ球活性化への関与が示唆された。2)MW2株の宿主免疫系による影響を探る:まずMW2を使用したマウス定着モデルを確立した。このIn vivo条件下の継代培養で、MW2のゲノムアイランドφSa3の欠損株を分離したが、in vitro条件下の継代培養では分離されなかった。また、免疫系の異なるマウスによってMW2ΔφSa3分離頻度が異なった。このMW2ΔφSa3株の病原性は、親株のMW2と異なり。ヒトリンパ球の活性化の低下、及びβ-ヘモリジンと定着性の活性化の上昇が見られた。MRSAの定着宿主免疫系の違いにより、MRSAの定着性と病原性に関与する遺伝子のゲノムリアレンジメントが生じた事を明らかにした。3)発光酵素ルシフェラーゼを用いたMRSA定着マウスモデルの確立した。マウスを生かしたまま経時的に測定するリアルイメージングシステムを使用して、鼻腔に定着した菌体内からの発光測定に成功した。4)薬剤耐性因子及び病原性因子を含むゲノムアイランドのタイピングの確立:ゲノムアイランドvSaは調べた限りのすべての株に存在しているという特徴がある。この特徴を利用して特異的なプライマーを作成しPCR法で、臨床分離MRSA株のゲノムアイランドのタイピングを確立した。これらタイプ別による病原性の相関性を検討し、将来、遺伝的背景から病原性の特定が期待される。この結果については、以下の3学会で発表した。第5回あわじしま感染症・免疫フォーラム、第88回日本細菌学会 関東支部総会、第54回日本感染症学学会・第53回日本化学療法学会 東日本支部 合同総会

This study is required to study in vivo the nature of the pathogenic pathogen of Butella flava, the expected genetic subgroups that disrupt the immune system of the species, and the interactions between the immune system of the infected host. 1)Functional analysis of immune disruptors: MHC disruptors, CNA(Collagen adhesion) and CHIPS(Chemotaxis Inhibitory Protein of Staphylococcus aureus) are selected and analyzed for the presence of virulent MRSA strain MW2, the relationship between infection and host immune system. MW2 is a parent plant, a missing mutant plant of each parent plant, and a mutant plant of each parent plant. The activity of MW2 mutants was decreased due to the presence of MHC, which was related to the activation of MHC. The MHC is the most important factor in the development of the disease. 2) To explore the effect of MW2 strain on host immune system: To establish the effect of MW2 strain on host immune system. In vitro culture, MW2 was isolated from the defective plants of φSa3. In vitro culture, it was isolated from the defective plants. The frequency of MW2ΔφSa3 isolation varies with the immune system. MW2ΔφSa3 strain is pathogenic, MW2 of parent strain is different. The decrease in the activation of the particles and the increase in the activation of the β-particles are observed. MRSA has a stable host immune system and is closely related to its pathogenicity. 3) Photoenzyme identification and identification of MRSA. The detection of the presence of the virus in the nasal cavity was successful. 4) The establishment of resistance factors and pathogenicity factors including the presence of plant resistance factors and pathogenicity factors: the presence of plant resistance factors and pathogenicity factors. The characteristics of MRSA were established by PCR using specific primers. The relationship between pathogenicity and genetic background is discussed in detail in the future. The result is that the following 3 things will happen. 5th Session Infectious Diseases and Immunology, 88th Session Kanto Branch of Japan Society of Bacteriology, 54th Session Infectious Diseases Society of Japan, 53rd Session East Japan Branch of Japan Society of Chemotherapy

项目成果

Mutations of PBP2a producing very high level resistance to beta-lactam antibiotic.

PBP2a 突变对 β-内酰胺抗生素产生非常高水平的耐药性。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Antimicrob.Agents Chemother. 48(2)
• 作者: Katayama Y.et al.;Katayama Y. et al.;Katayama Y. et al.
• 通讯作者: Katayama Y. et al.

Genetic background affects stability of mecA in Staphylococcus aureus.

遗传背景影响金黄色葡萄球菌中 mecA 的稳定性。

• DOI: 10.1128/jcm.43.5.2380-2383.2005
• 发表时间: 2005
• 期刊: Journal of clinical microbiology
• 影响因子: 9.4
• 作者: Katayama,Yuki;Robinson,DAshley;Enright,MarkC;Chambers,HenryF
• 通讯作者: Chambers,HenryF