テロメレース活性化の分子機構の解明

阐明端粒酶激活的分子机制

• 批准号: 16021215
• 负责人: 京 哲
• 金额: $ 3.07万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16021215/
• 关键词: hTERT; telomerase; telomere; regulation; HIF1; ERM

我々は1999年にhTERTプロモーターのクローニングに成功して以来、hTERT発現の分子機構を解析してきた。hTERT転写活性化因子としてc-Myc/MaxやSp1,ER, EWSなどいくつかの因子を見いだしたがこれらの因子では癌特異的なテロメレース活性化機構を説明するのは不十分であり、他に重要な機構が存在すると推定される。そのひとつが正常細胞におけるhTERT抑制機構である。今回の研究ではERM (Enhanced Retroviral Mutagenesis) systemを用いてhTERT転写抑制因子のクローニングを試みた。HeLa細胞を用いてtTA細胞を樹立し、hTERT promoter-GFPレポーター遺伝子を導入した。TREおよびsplicing donar sequenceを含むプロモーター領域をLTR下流につないだレトロウイルスベクターを上記tTA細胞に導入し、GFP発光強度が著しく減少した細胞集団をFACS解析にて回収した。さらに2次スクリーニングでテトラサイクリンを添加し、GFP陽性転化する2クローンを回収した。現在これらのクローンでレトロウイルス下流に存在する遺伝子の単離を進めている。さらにhTERT転写活性化に関わる新たな転写因子として低酸素環境下に誘導されるHIF1がhTERT core promoterのE-boxに直接結合し、低酸素化で腫瘍細胞のhTERT転写活性化に重要な役割を演じていることを明らかにした。

Since the success of the hTERT election in 1999, hTERT has seen the molecular organization analyze the information industry. HTERT writes the activation factor c-Myc/Max Sp1,ER, the EWS activation factor, the activation factor, the cancer factor, the cancer specific factor, the cancer factor, the cancer factor, the cancer The hTERT inhibition mechanism is affected by the normal cell cycle. This time, the ERM (Enhanced Retroviral Mutagenesis) system uses the "hTERT" to write the inhibitory factor. The HeLa cell is loaded with the tTA cell, and the hTERT promoter-GFP cell is entered into the cell. The TRE signal splicing donar sequence contains the following information: in the field, the lower level of the LTR, the lower level of the tTA cell, the input of the cell, the light intensity of the GFP, the FACS analysis of the cell set, the cell density of the cell set, the number of cells, the number of cells. This is the second time that you have to add something and GFP to change it twice. Now that you have a problem, there is a problem that you are not allowed to do so. In the environment of low acid content, the direct combination of HIF1 hTERT core promoter E-box and the activation of hTERT in the environment of low acid content is very important.

项目成果

EWS/ETS fusions activate telomerase in Ewing's tumors.

• 发表时间: 2003-12
• 期刊: Cancer research
• 影响因子: 11.2
• 作者: A. Takahashi;F. Higashino;Mariko Aoyagi;Koichi Yoshida;M. Itoh;S. Kyo;T. Ohno;T. Taira;H. Ariga;Kohichi Nakajima;M. Hatta;Masanobu Kobayashi;H. Sano;T. Kohgo;M. Shindoh

Therapeutic efficacy of PUMA for malignant glioma cells regardless of the p53 status

无论 p53 状态如何，PUMA 对恶性胶质瘤细胞的治疗效果

• 发表时间: 2005
• 期刊: Hum.Gene Ther 16
• 作者: Ito H;Kyo S et al.
• 通讯作者: Kyo S et al.

Enhanced oncolysis by OBP-405, a tropism-modified telomerase-specific replication-selective adenoviral agent

OBP-405（一种向性修饰的端粒酶特异性复制选择性腺病毒药物）增强溶瘤作用

• 期刊: Oncogene (in press)
• 作者: Taki M;Kyo S et al.
• 通讯作者: Kyo S et al.

Visualization of intrathoracically disseminated solid tumors in mice with optical imaging by telomerase-specific amplification of a transferred green fluorescent protein gene.

通过端粒酶特异性扩增转移的绿色荧光蛋白基因，通过光学成像观察小鼠胸腔内播散的实体瘤。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Cancer Research 64
• 作者: Umeoka T;Fujiwara T;et al.
• 通讯作者: et al.

Efficient inhibition of hTERT expression by RNA interference sensitizes cancer cells to ionizing radiation and chemotherapy.

通过 RNA 干扰有效抑制 hTERT 表达，使癌细胞对电离辐射和化疗敏感。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Hum.Gene Ther. 16
• 作者: Nakamura M;et al.
• 通讯作者: et al.