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癌細胞浸潤における細胞内アクチンの求心性流動の役割

细胞内肌动蛋白传入流在癌细胞侵袭中的作用

基本信息

批准号：
16022234
负责人：
渡邊直樹
金额：
$ 3.33万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16022234/
关键词：
レトログレードフロー葉状仮足細胞伸展アクチン重合 Formin mDia1 Rho ミオシン

项目摘要

生細胞内アクチン線維の移動とその重合、脱重合を可視化する単分子蛍光スペックル法を用い、細胞伸展端を解析し、(1)フィロポディアとラメリポディアの先端では、異なる様式でアクチン重合がアクチンの求心性流動と連関している。特にラメリポディア先端のアクチン重合速度はミオシン阻害によるアクチン流動の速度変化に加え、細胞の変形にも強く影響をうけることを見出した(投稿準備中)。現在、アクチン流動に影響が知られるBDMなどの薬剤の作用をリコンビナントミオシンを作製し、解析中。(2)癌浸潤に関与が知られるG蛋白質Rhoの標的分子で、Formin関連分子の1つmDia1について、蛍光単分子スペックル解析を行った。mDia1のアクチンファイバー誘導活性のあるドメイン、FH1-FH2構造が生細胞内で重合するアクチンの伸長端にプロセッシヴに結合しながら長距離を分子移動することを発見した。また、顕微鏡下で、精製されたアクチン、プロフィリン、mDia1を用い、mDia1が重合をつづけるアクチン伸長端に会合する結果を見い出した。今回の発見はモーター蛋白質以外で長距離を移動する分子機構が存在することを、しかもそれを生細胞内で明らかにした(Science誌に発表)。(3)他にアクチンの主要な調節分子と考えられるARP2/3複合体やキャッピングプロテインなどの蛍光蛋白質の単分子スペックル解析にも成功し、細胞伸展部の葉状仮足内でアクチン線維切断が恒常的に存在することを示唆する結果を得た(投稿準備中)。

The movement, overlap, and misalignment of the cellular line dimensions can be visualized by using the single-molecule fluorescence method. The cell extension ends can be analyzed.(1) The tip of the cell is separated from the tip of the cell. The velocity of flow increases and the shape of cells increases.(In preparation for submission) Now, the influence of traffic flow is known, and the function of BDM is analyzed. (2)G-Protein Rho Target Molecules Related to Cancer Infiltration and Detection, Formin-Related Molecules 1 mDia1, Light Molecules Selection Analysis mDia1-FH1-FH2 construct was found to be able to induce molecular mobility over long distances due to overlapping and elongation in living cells. The results of the micro-mirror, refinement, mDia1 application, mDia1 overlap, extension and convergence can be seen. Now it is discovered that molecular mechanisms that move long distances beyond proteins exist within living cells (Science). (3)The analysis of ARP2/3 complex, the main regulatory molecule of the protein, was successful, and the results showed that there was a constant presence of ARP2/3 complex in the leaf-like foot of the cell extension (preparation for submission).