M期チェックポイント遺伝子CHFRを標的とした微小管阻害剤感受性診断法の開発

针对M期检查点基因CHFR的微管抑制剂敏感性诊断方法的开发

• 批准号: 16023256
• 负责人: 見田 裕章
• 金额: $ 3.84万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16023256/
• 关键词: 分裂期; 微小管阻害剤; 薬剤感受性

癌で高率に異常なメチル化を受けているCHFRは、微小管阻害剤に反応し分裂期チェックポイント機能を担う重要なRING型ユビキチンリガーゼである。本研究ではCHFR結合分子の同定を試み、微小管ストレスに対する応答や細胞死のメカニズムを明らかにし微小管阻害剤感受性診断法へ応用することを目的とした。酵母two-hybrid法によるCHFR結合分子のスクリーニングで、ユビキチン前駆体、複数のE2酵素および他の分子が同定された。単離された分子のうち、clone #319はCHFRのFHAドメインに結合を示すことがtwo-hybrid法による解析で確認された。#319のmRNA発現レベルはdocetaxel投与後24時間まで一定であり、微小管ストレス下でCHFRの補助因子として機能する可能性が示唆された。一方単離されたE2酵素のうち、Ubc13はCHFRを介したユビキチン化に関与し、CHFRによる非分解系のポリユビキチン化の重要性を示した。GFP-CHFRを安定発現するHela細胞を樹立しその細胞内局在を解析した所、GFP-CHFRは間期は核内に存在し、分裂期の核膜崩壊後は細胞全体に拡散、細胞質分裂後は再び核内に集積することを明らかにした。またGFP-CHFRの細胞内局在は微小管阻害剤処理後も処理前と同様のパターンを示した。GFP-CHFRを用いたCHFRの蛋白安定性の解析では、CHFR自身は微小管ストレス下や分裂期においても安定であることが示された。また、口腔癌細胞のCHFRのRNAiノックダウン実験により、微小管阻害剤によるmitotic indexと細胞死の増加が確認され、微小管阻害剤の感受性増強にCHFRの発現低下が重要であることを明らかにした。今後はCHFRの基質の探索を通して微小管阻害剤感受性を規定するメカニズムを解明したい。

Cancer で high rate of abnormal に な メ チ ル change を by け て い る CHFR は, tiny pipe resistance against tonic に anti 応 し divide チ ェ ッ ク ポ イ ン ト function を bear う important な RING type ユ ビ キ チ ン リ ガ ー ゼ で あ る. This study で は CHFR combining molecular の with を try み, tiny tube ス ト レ ス に す seaborne る 応 answer や cell death の メ カ ニ ズ ム を Ming ら か に し tiny pipe resistance against tonic susceptibility diagnostics へ 応 with す る こ と を purpose と し た. Yeast two hybrid method に よ る CHFR combining molecular の ス ク リ ー ニ ン グ で, ユ ビ キ チ ン 駆 body, before the plural の E2 enzyme お よ び が の molecules with his さ れ た. 単 from さ れ た molecular の う ち, clone # 319 は CHFR の FHA ド メ イ ン に combining を shown す こ と が two hybrid method に よ る parsing で confirm さ れ た. # 319 の mRNA 発 now レ ベ ル は docetaxel cast time and after 24 ま で certain で あ り, tiny tubes ス ト レ ス under で CHFR の subsidy factor と し て function す が る possibility in stopping さ れ た. Party 単 from さ れ た E2 enzyme の う ち, Ubc13 は CHFR を interface し た ユ ビ キ チ ン change に masato and し, CHFR に よ る the decomposition is の ポ リ ユ ビ キ チ ン change の importance を shown し た. GFP - CHFR を settle 発 now す る Hela を set し そ の cells inside bureau in analytical し を た, GFP - CHFR は interphase は に し, split phase within the nuclear の nuclear membrane collapse 壊 は cells after all に company, and cytoplasm divided within は び nuclear again after に set product す る こ と を Ming ら か に し た. Youdaoplaceholder0 GFP-CHFR <s:1> intracellular localization after <s:1> microtubule inhibitor treatment また before treatment と the same <s:1> パタ <s:1> を を を を を shows た た. GFP - CHFR を with い た CHFR の protein stability analytical で の は は CHFR themselves small tube ス ト レ ス や split phase under に お い て も settle で あ る こ と が shown さ れ た. ま た, oral cancer cells の CHFR の RNAi ノ ッ ク ダ ウ ン be 験 に よ り, tiny pipe resistance against tonic に よ る mitotic index と cell death の raised plus が confirm さ れ, tiny pipe resistance against strong tonic の feelings of sexual rights に CHFR の 発 now low が important で あ る こ と を Ming ら か に し た. In the future, the exploration of the <s:1> CHFR <s:1> matrix <e:1> will be conducted through を to clarify the <s:1> regulation on the susceptibility of microtubule inhibitors て and するメカニズムを to explain <s:1> た た.

项目成果

Epigenetic inactivation of classII transactivator (CIITA) is associated with the absence of interferon-gamma-induced HLA-DR expression in colorectal and gastric cancer cells.

II 类反式激活因子 (CIITA) 的表观遗传失活与结直肠癌细胞和胃癌细胞中干扰素 γ 诱导的 HLA-DR 表达缺失有关。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Oncogene 23・55
• 作者: Nakano K;Nomura R;Shimizu N;Nakagawa I;Hamada S;Ooshima T.;Nakano K et al.;Maruyama R et al.;Akino K et al.;Kang X et al.;Kusano M et al.;King KE et al.;Okuda H et al.;Terasawa K et al.;Maruyama R et al.;Akino K et al.;Kang X et al.;Kusano M et al.;King KE et al.;Okuda H et al.;Terasawa K et al.;Maruyama et al.;Kusano M et al.;King KE et al.;Terasawa K et al.;Kang X et al.;Ogi K et al.;Sasaki Y et al.;Irifune H et al.;Aoki M et al.;Simbulan-Rosenthal CM et al.;Murai M et al.;Ikeda H et al.;Murai M et al.;Odajima T et al.;Murata M et al.;Abe T et al.;Ogi K et al.;Sasaki Y et al.;Irifune H et al.;Aoki M et al.;Simbulan-Rosenthal CM et al.;Murai M et al.;Ikeda H et al.;Murai M et al.;Odajima T et al.;Murata M et al.;Abe T et al.;Ogi K et al.;Odajima T et al.;Abe T et al.;Aoki M;Murata M;Adachi K et al.;Suzuki H et al.;Tokino T;Satoh A et al.
• 通讯作者: Satoh A et al.

Aberrant DNA methylation associated with silencing BNIP3 gene expression in haematopoietic tumours.

• DOI: 10.1038/sj.bjc.6602422
• 发表时间: 2005-03-28
• 期刊: British journal of cancer
• 影响因子: 8.8

Aberrant methylation and histone deacetylation associated with silencing of SLC5A8 in gastric cancer

• DOI: 10.1159/000079145
• 发表时间: 2004-01-01
• 期刊: TUMOR BIOLOGY
• 作者: Ueno, M;Toyota, M;Imai, K
• 通讯作者: Imai, K

Epigenetic inactivation of TMS1/ASC in ovarian cancer

• DOI: 10.1158/1078-0432.ccr-0932-03
• 发表时间: 2004-03-15
• 期刊: CLINICAL CANCER RESEARCH
• 影响因子: 11.5
• 作者: Terasawa, K;Sagae, S;Kudo, R
• 通讯作者: Kudo, R

Inactivation of class II transactivator by DNA methylation and histone deacetylation associated with absence of HLA-DR induction by interferon-gamma in haematopoietic tumour cells.

通过DNA甲基化和组蛋白脱乙酰化对II类反式激活剂的失活与干扰素 - 伽马在造血性肿瘤细胞中缺乏HLA-DR诱导相关。

• DOI: 10.1038/sj.bjc.6601602
• 发表时间: 2004-02-23
• 期刊: BRITISH JOURNAL OF CANCER
• 影响因子: 8.8
• 作者: Morimoto, Y;Toyota, M;Satoh, A;Murai, M;Mita, H;Suzuki, H;Takamura, Y;Ikeda, H;Ishida, T;Sato, N;Tokino, T;Imai, K
• 通讯作者: Imai, K