分裂酵母Mis6動原体複合体が果たすM期チェックポイント機能の解明
阐明裂殖酵母 Mis6 着丝粒复合体的 M 期检查点功能
基本信息
- 批准号:16026244
- 负责人:
- 金额:$ 2.37万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
- 财政年份:2004
- 资助国家:日本
- 起止时间:2004 至 2005
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
M期チェックポイントは、スピンドルと動原体(キネトコア)が正しく結合するまでM期中期から後期への細胞周期の進行を抑制する制御機構です。本研究では、「Mis6-Sim4複合体を含む動原体構成要素がM期チェックポイント機構においてどのような役割を果たしているか」に焦点を当てて解析を進めてきました。昨年度までに、Mis6-Sim4機能あるいはNuf2機能が損なわれるとM期チェックポイント機構の構成因子であるMad2蛋白質が動原体に局在化出来なくなることを見出しました。Nuf2複合体は、M期におけるMis6複合体の安定な動原体局在に必須でした。これらを受けて本年度は、Mis6複合体とMad2蛋白質の物理的相互作用についての可能性を検討しました。その結果、Mis6複合体とMad2蛋白質が細胞内で物理的に結合することを示す結果を免疫沈降法により得ました。この物理的相互作用は、M期チェックポイントが活性化されている細胞でのみ起こっており、Mad2の動原体局在化との関連性が強く示唆されました。さらに、Mis6蛋白質の部分断片を用いた解析により、Mis6がそのN末領域を介してMad2と結合している可能性が示唆されました。興味深いことに、このMis6 N末断片は間期には核全体、M期にはスピンドル上に局在化することが明らかになりました。これらの結果は、Mis6複合体が動原体とスピンドルの両方と相互作用し得ることを示しており、さらに動原体とスピンドルの結合状態をモニターしてMad2の局在状態をコントロールする制御装置として機能している可能性を示唆していました。これらの成果の一部を、他の研究プロジェクトより得られた成果とあわせてMolecular Biology of the Cell誌に公表しました。
The control mechanism for inhibiting the progression of cell cycle from metaphase M to anaphase M is established. This study focuses on the analysis of Mis6-Sim4 complex, which contains the components of the kinetosome and the mechanism of the complex. Mis6-Sim4 function, Mis6-Sim4 The Nuf2 complex is essential for the stability of the Mis6 complex during the M phase. This year, the possibility of a physical interaction between the Mis6 complex and the Mad2 protein was explored. The results showed that the Mis6 complex and Mad2 protein were physically bound in cells, and the results were obtained by immunoprecipitation method. The physical interaction between the two groups strongly indicates the relationship between the activation of the cell and the activation of the Mad2 gene. The possibility of binding to a fragment of the Mis-6 protein in the N-terminal domain was demonstrated. In the middle of the morning, the sun rises, the sun rises, and the sun rises. As a result, the interaction between the Mis6 complex and the kinetogen is shown. The binding state of the kinetogen is shown. The control device is shown in the state of Mad2. The results of this research are published in Molecular Biology of the Cell.
项目成果
期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Spindle checkpoint signaling requires the Mis6 kinetochore subcomplex, which interacts with Mad2 and mitotic spindles
- DOI:10.1091/mbc.e05-01-0014
- 发表时间:2005-08-01
- 期刊:
- 影响因子:3.3
- 作者:Saitoh, S;Ishii, K;Takahashi, K
- 通讯作者:Takahashi, K
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