神経細胞の自律的移動プログラム

神经元自主迁移程序

基本信息

批准号：
16027207
负责人：
林謙介
金额：
$ 3.84万
依托单位：
Sophia University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

神経の発生初期にニューロンはほとんど例外なく移動する。これまでの我々の研究により、ニューロンの移動能力はニューロンの種類によって固有に備わったものであり、細胞自律的に制御されている可能性が示されている。本研究はニューロンの移動能をコントロールする細胞内メカニズムを明らかにすることを目的とする。前年度の研究では微小管切断酵素カタニンに着目し、神経細胞においてカタニンの発現を抑制すると神経突起形成に影響が現れる事を報告した。今年度は、細胞の形態や運動性におけるカタニンの役割をさらに明らかにするために、繊維芽細胞においてカタニンノックダウン実験をおこない、詳細な解析を行った。(1)カタニンの抑制により、微小管の本数の減少・長さの増加を期待し比較したが、特に違いは見られなかった。(2)微小管の遠心分離により、微小管の重合度を比較したが、カタニンの発現を抑制しても重合度に大きな違いはなかった。(3)細胞分裂中の紡錘体においてカタニンの発現が抑えられると、γ-チューブリンの存在領域が狭くなると考えられる。γ-チューブリン免疫染色にて比較したが、これも大きな違いは見られなかった。(4)siRNAを導入した細胞の運動をタイムラプス観察した。コントロールの細胞に比べて、カタニンの発現を抑制した細胞では移動性が抑えられていることが観察された。ただし、これについてはさらに多くの観察が必要である。本研究では、カタニンの抑制による劇的な効果を見ることは出来なかった。従って、極性を持つ神経細胞と、極性を持たない線維芽細胞では、カタニンの役割に違いがあることが明らかになった。

在神经发育的早期，神经元几乎没有例外地迁移。我们以前的研究表明，神经元迁移能力是神经元类型中固有的独特性，可以受到细胞自主的控制。这项研究旨在阐明控制神经元迁移率的细胞内机制。在上一年的一项研究中，我们专注于微管裂解酶稳定蛋白，并报告抑制神经元中稳定蛋白的表达会影响神经突的形成。今年，为了进一步阐明稳定蛋白在细胞形态和运动性中的作用，在成纤维细胞中进行了稳定性敲低实验，并进行了详细的分析。（1）我们将结果与抑制稳定蛋白的抑制作用的希望减少和长度增加的希望进行了比较，但没有发现特定的差异。（2）通过离心微管比较微管的聚合程度，但即使抑制了稳定蛋白表达，聚合的程度也没有显着差异。（3）人们认为，如果在细胞分裂期间稳定蛋白的表达在纺锤体中被抑制，则γ-微管蛋白的区域被狭窄。尽管使用γ-微管蛋白免疫染色进行了比较，但也未观察到显着差异。（4）对siRNA引入的细胞运动的延时观察。据观察，与对照细胞相比，抑制稳定蛋白表达的细胞中迁移率受到抑制。但是，对此需要更多的观察。在这项研究中，我们看不到抑制稳定蛋白的戏剧性影响。因此，已经揭示了极性神经元和非磨性成纤维细胞之间稳定蛋白的作用存在差异。