樹状突起スパインの神経防御機能の検証

树突棘神经保护功能的验证

• 批准号: 11157204
• 负责人: 林 謙介
• 金额: $ 0.83万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11157204/
• 关键词: 細胞性粘菌; 分化誘導因子; 神経細胞; 初代培養; 細胞死; 細胞毒性

DIFは細胞性粘菌において柄細胞への分化を誘導する因子である。近年、DIFが哺乳動物の腫瘍細胞に対して細胞増殖抑制、分化誘導、アポトーシス誘導などの作用を持つことが報告されている。我々はラット大脳皮質の初代培養神経細胞に対するDIFの効果について調べた。1.神経細胞に対しても分化促進効果があるかを調べるために、各種の分化マーカの発現を、RT-PCRで調べたが分化促進の効果は認められなかった。2.成熟した神経細胞にDIFを与えると樹状突起の数珠状化や細胞体の膨張などの細胞変性が見られた。培養初期の未成熟な細胞に対しては高濃度(20μM)、数日間でも無効だったが、培養3週目の神経細胞では低濃度(無血清培地では5μM,血清培地では10μM)、2時間で形態異常が見られた。3.DIFによる変性が過剰なカルシウム流入によるものである可能性を考え、細胞内カルシウム濃度変化を調べた。無血清培地において、5μMのDIFを与えても細胞内カルシウムは自発的な濃度上昇のレベル以上には上がらなかった。4.DIFによるimmediate early geneの発現誘導を調べた。培養3週目の神経細胞に5μMのDIFを2時間作用させるとc-fosの発現が上昇したが、zif/268やarcの発現に影響はなかった。10μM picrotoxinではすべての発現が上昇した。5.DIFによる神経細胞からのNO放出を調べた。5μMのDIFによってNO放出の上昇を認めた。以上のことからDIFは神経細胞に過興奮をおこさせることなく細胞変性を誘発すること、それがNOを介している可能性が示唆された。

DIF is an inducer of cellular differentiation. In recent years, DIF has been reported to inhibit proliferation, induce differentiation and induce apoptosis in mammalian tumor cells. The results of DIF in primary cultured neurons of large cortex were investigated. 1. The effects of promoting differentiation in neurons can be regulated, and the effects of promoting differentiation through the discovery of various differentiation markers and the regulation of RT-PCR can be regulated. 2. Mature neurons are dified and dendritic, and cell bodies are expanded and differentiated. At the beginning of culture, immature cells were cultured at high concentration (20μM), at several days without serum, at 3 weeks with low concentration (5μM in serum-free culture and 10μM in serum-free culture), and at 2 days with morphological abnormalities. 3. DIF changes the possibility of cell influx and intracellular concentration. Serum-free culture medium, 5μM DIF, and the intracellular concentration of the drug increased spontaneously. 4. DIF is the first to induce the development of immediate early gene. After 3 weeks of culture, the expression of c-fos increased with DIF at 5μM, and the expression of zif/268 increased with time. 10μM picrotoxin was found to increase in activity. 5. DIF regulates NO emission from neurons. 5μM DIF and NO emission increase. The above DIF is not only excited but also induced by NO

项目成果

Cheng,X-T: "Non muscle myosin II-B-like immunoreactivity is present at the drebrin-binding cytoskeleton in neurons"Neuroscience Research. 36. 167-173 (2000)

Cheng，X-T：“神经元中的 Drebrin 结合细胞骨架中存在非肌肉肌球蛋白 II-B 样免疫反应性”神经科学研究。

林 謙介: "Shape change of dendritic spines caused by overexpression of drebrin in cultured cortical neurons"Journal of Neuroscience. 19. 3918-3825 (1999)

Kensuke Hayashi：“培养皮质神经元中 Drebrin 过度表达引起的树突棘形状变化”《神经科学杂志》19. 3918-3825 (1999)。

林 謙介: "Domain analysis on the actin-binding and actin-remodeling activities of drebrin"Experimeutal Cell Research. 253. 673-680 (1999)

Kensuke Hayashi：“drebrin 肌动蛋白结合和肌动蛋白重塑活性的域分析”实验细胞研究 253. 673-680 (1999)。

林 謙介: "樹状突起スパインの形態変化とアクチン結合蛋白"生化学. 71. 520-523 (1999)

Kensuke Hayashi：“树突棘和肌动蛋白结合蛋白的形态变化”《生物化学》71. 520-523 (1999)。