樹状突起スパインの神経防御機能の検証

树突棘神经保护功能的验证

基本信息

批准号：
11157204
负责人：
林謙介
金额：
$ 0.83万
依托单位：
Gunma University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11157204/
关键词：
細胞性粘菌分化誘導因子神経細胞初代培養細胞死細胞毒性

项目摘要

DIFは細胞性粘菌において柄細胞への分化を誘導する因子である。近年、DIFが哺乳動物の腫瘍細胞に対して細胞増殖抑制、分化誘導、アポトーシス誘導などの作用を持つことが報告されている。我々はラット大脳皮質の初代培養神経細胞に対するDIFの効果について調べた。1.神経細胞に対しても分化促進効果があるかを調べるために、各種の分化マーカの発現を、RT-PCRで調べたが分化促進の効果は認められなかった。2.成熟した神経細胞にDIFを与えると樹状突起の数珠状化や細胞体の膨張などの細胞変性が見られた。培養初期の未成熟な細胞に対しては高濃度(20μM)、数日間でも無効だったが、培養3週目の神経細胞では低濃度(無血清培地では5μM,血清培地では10μM)、2時間で形態異常が見られた。3.DIFによる変性が過剰なカルシウム流入によるものである可能性を考え、細胞内カルシウム濃度変化を調べた。無血清培地において、5μMのDIFを与えても細胞内カルシウムは自発的な濃度上昇のレベル以上には上がらなかった。4.DIFによるimmediate early geneの発現誘導を調べた。培養3週目の神経細胞に5μMのDIFを2時間作用させるとc-fosの発現が上昇したが、zif/268やarcの発現に影響はなかった。10μM picrotoxinではすべての発現が上昇した。5.DIFによる神経細胞からのNO放出を調べた。5μMのDIFによってNO放出の上昇を認めた。以上のことからDIFは神経細胞に過興奮をおこさせることなく細胞変性を誘発すること、それがNOを介している可能性が示唆された。

DIF是诱导细胞粘液霉菌中核苷细胞分化的因素。最近，据报道，DIF对哺乳动物肿瘤细胞有影响，例如抑制细胞增殖，诱导分化和诱导凋亡。我们研究了DIF对大鼠脑皮质中原代神经元的影响。 1。研究是否还通过RT-PCR研究了分化启动子对神经元的影响，但未观察到促进分化的影响。 2。当对成熟的神经元进行DIF时，观察到细胞变性，例如树突念珠和细胞体膨胀。尽管在培养的早期阶段，高浓度（20μM）对未成熟细胞无效，但即使几天后，培养的第三周的神经元仍低浓度（无血清培养基为5μm，血清中的10μM）和在2小时下观察到形成异常。 3。考虑到由DIF引起的变性是由钙流量过多引起的，我们研究了细胞内钙浓度的变化。在无血清培养基中，5μMDIV并未超过自发浓度水平的增加。 4。通过DIF诱导立即的早期基因表达。在培养3周的神经元上作用5μMDIF2小时增加了C-FOS的表达，但不会影响ZIF/268或ARC的表达。用10μMICROTOXIN升高所有表达。 5。研究了DIF从神经元释放。在5μm的DIF中观察到无释放的增加。以上表明DIF会诱导细胞变性而不会引起神经元过度刺激，并且可能是通过NO。