リゾチーム・αラクトアルブミンの構造変換と細胞結合機能

溶菌酶/α-乳清蛋白的结构转化和细胞结合功能

基本信息

批准号：
16041201
负责人：
出村誠
金额：
$ 5.7万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

α-ラクトアルブミン(α-LA)はミルクに含まれる123残基からなるカルシウム結合蛋白質で、β-1,4-ガラクトース転移酵素の基質選択性の補因子機能をもつ。α-LAの構造は天然状態において、N末端側1-34残基とC末端側86-123残基にα-helical構造を形成し、中間の35-85残基はβ-sheet構造を持つ。低pHやカルシウムフリーの条件下では折りたたみ中間体(MG状態)を形成する。一方、ヒトミルクから単離されたオレイン酸-α-LA複合体が癌細胞死を誘導する新たな機能が報告された。しかし、生物種ごとのα-LAのMG状態形成との関係や、α-LAの活性化部位、オレイン酸結合部位などの詳細は不明である。本年度は昨年度に引き続き、本研究ではホモロジーの高いヒト型α-LA(HLA)、ウシ型α-LA(BLA)およびこれらの遺伝子組み換え体を用い、各種脂肪酸-α-LA複合体の調整方法の考案と細胞死誘導活性を評価した。調整方法として従来よりもより簡便な熱処理法を考案した。この方法は、従来法より多くの利点をもつので、特許出願した。この方法により、牛乳からアポトーシス誘導型調整試料を作製できた。

α-乳蛋白（α-LA）是一种钙结合蛋白，由牛奶中的123个残基组成，具有辅助因子功能，用于β-1,4-乳糖转移酶的底物选择性。在其天然状态下，α-LA的结构在N末端1-34的残基形成α-螺旋结构，在C末端形成86-123，而35-85的中间残基具有β-折叠结构。在低pH和无钙条件下，折叠中间体（Mg状态）形式。同时，已经报道了从人奶中分离的油酸-α-LA复合物的新功能。但是，诸如每个物种的Mg状态形成α-LA的关系，α-LA的激活位点和油酸结合位点之间的关系尚不清楚。在今年，在去年之后，这项研究使用了高度同源性人型α-LA（HLA），牛α-LA（BLA）和转基因化合物来开发用于调节各种脂肪酸-α-LA复合物并评估其细胞死亡诱导活性的方法。作为调整方法，已经设计了一种更方便的热处理方法。该方法比常规方法具有许多优势，并已提交专利申请。通过这种方法，可以用牛奶制备诱导细胞凋亡的制剂样品。

项目成果

期刊论文数量（20）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Disassembling and Bleaching of chloride-free pharaonis halorthodopsin by octyl-beta-glucoside

辛基-β-葡萄糖苷对无氯雉盐视紫红质的分解和漂白

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Biochemistry 44
影响因子：
0
作者：
内田諭;杤久保文嘉;渡辺恒雄;T.Ichitsubo;Safwat Hassaballa;Safwat Hassaballa;Safwat Hassaballa;Safwat Hassaballa;村岡克紀;M.Kubo
通讯作者：
M.Kubo

Effects of the Stabilization of the Molten Globule State on the Folding Mechanism of alpha-Lactalbumin : A Study of a Chimera of Bovine and Human alpha-Lactalbumin

熔球状态的稳定对α-乳清蛋白折叠机制的影响：牛和人α-乳清蛋白嵌合体的研究

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Proteins 61
影响因子：
0
作者：
内田諭;杤久保文嘉;渡辺恒雄;T.Ichitsubo;Safwat Hassaballa;Safwat Hassaballa;Safwat Hassaballa;Safwat Hassaballa;村岡克紀;M.Kubo;M.Shibata;T.Sasaki;M.Mizuguchi
通讯作者：
M.Mizuguchi

Photobleaching of Bacteriorhodopsin Solubilized with Triton X-100

DOI：
10.1562/2005-03-22-ra-470
发表时间：
2005-09
期刊：
影响因子：
0
作者：
Takanori Sasaki;M. Sonoyama;M. Demura;S. Mitaku
通讯作者：
Takanori Sasaki;M. Sonoyama;M. Demura;S. Mitaku

Effect of Hydrostatic Pressure on Conformational Changes of Canine Milk Lysozyme between the Native, Molten Globule, and Unfolded States

静水压力对犬乳溶菌酶在天然状态、熔球状态和展开状态之间构象变化的影响

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
Biochim.Biophys.Acta 1702
影响因子：
0
作者：
I.Ohmukai;H.Takeda;M.Hamasaki;K.Numa;S.Adachi;T.Nakamura;M.Demura;M.Sato;M.Mizuguchi;M.Kubo;M.Yoshida et al.;M.Watanabe et al.
通讯作者：
M.Watanabe et al.

Interaction of dopamine and acetylcholine with an amphiphilic resorcinarene receptor in aqueous micelle system

DOI：
10.1016/j.bmcl.2005.01.012
发表时间：
2005-03-01
期刊：
BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS
影响因子：
2.7
作者：
Demura, M;Yoshida, T;Tóth, K
通讯作者：
Tóth, K

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通讯作者：
石森浩一郎

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重村洋明;菊川峰志;宮内正二;出村誠;加茂直樹;菊川峰志;宮内正二;Takashi Kikukawa.;Seiji Miyauchi.;宮内正二;桑山健次;Seiji Miyauchi.;Kenji Kuwayama.;Seiji Miyauchi;Seiji Miyauchi.;Takashi Yamamoto.;宮内正二;菊川峰志;Seiji Miyauchi.;Takashi Kikukawa.;Seiji Miyauchi;Seiji Miyauchi.;宮内正二;山本崇;宮内正二;宮内正二;杉林堅次;杉林堅次
通讯作者：
杉林堅次

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发表时间：
2007
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影响因子：
0
作者：
重村洋明;菊川峰志;宮内正二;出村誠;加茂直樹;菊川峰志;宮内正二;Takashi Kikukawa.;Seiji Miyauchi.;宮内正二;桑山健次;Seiji Miyauchi.;Kenji Kuwayama.;Seiji Miyauchi
通讯作者：
Seiji Miyauchi

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2011
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作者：
日下部力;菊川峰志;神谷昌克; 相沢智康;河野敬一;井原邦夫; 加茂直樹;出村誠;Y. Yotsumoto,Y. Mochizuki,M. Suzuki,K. Nishigaki,N. Nemoto
通讯作者：
Y. Yotsumoto,Y. Mochizuki,M. Suzuki,K. Nishigaki,N. Nemoto