リゾチーム・αラクトアルブミンの構造変換と細胞結合機能

溶菌酶/α-乳清蛋白的结构转化和细胞结合功能

• 批准号: 16041201
• 负责人: 出村 誠
• 金额: $ 5.7万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16041201/
• 关键词: アポトーシス; αラクトアルブミン; タンパク質; オレイン酸; NMR; キメラ; 圧力変性; 立体構造; ラクトアルブミン; リゾチーム

α-ラクトアルブミン(α-LA)はミルクに含まれる123残基からなるカルシウム結合蛋白質で、β-1,4-ガラクトース転移酵素の基質選択性の補因子機能をもつ。α-LAの構造は天然状態において、N末端側1-34残基とC末端側86-123残基にα-helical構造を形成し、中間の35-85残基はβ-sheet構造を持つ。低pHやカルシウムフリーの条件下では折りたたみ中間体(MG状態)を形成する。一方、ヒトミルクから単離されたオレイン酸-α-LA複合体が癌細胞死を誘導する新たな機能が報告された。しかし、生物種ごとのα-LAのMG状態形成との関係や、α-LAの活性化部位、オレイン酸結合部位などの詳細は不明である。本年度は昨年度に引き続き、本研究ではホモロジーの高いヒト型α-LA(HLA)、ウシ型α-LA(BLA)およびこれらの遺伝子組み換え体を用い、各種脂肪酸-α-LA複合体の調整方法の考案と細胞死誘導活性を評価した。調整方法として従来よりもより簡便な熱処理法を考案した。この方法は、従来法より多くの利点をもつので、特許出願した。この方法により、牛乳からアポトーシス誘導型調整試料を作製できた。

α-LA (α-LA) contains 123 residues and binds to protein, β-1,4-LA and enzyme matrix selectivity and complement factor function. The structure of α-LA is different from that of the natural state. Residues 1-34 on the N terminal side and residues 86-123 on the C terminal side form α-helical structure, and residues 35-85 in the middle form β-sheet structure. Under the condition of low pH, the intermediate (MG state) can be formed. A novel function of the α-LA complex in inducing cancer cell death was reported. The relationship between α-LA and MG state formation in biological species, the activation site of α-LA, and the acid binding site are unknown. This year, we reviewed the study on the use of high level α-LA(HLA), α-LA(BLA) and α-LA complexes in the study, and evaluated the cell death-inducing activity of various fatty acid-α-LA complexes. The adjustment method is simple and convenient. This method is not, the method is not This method is suitable for the preparation of inductive adjustment samples.

项目成果

Effects of the Stabilization of the Molten Globule State on the Folding Mechanism of alpha-Lactalbumin : A Study of a Chimera of Bovine and Human alpha-Lactalbumin

熔球状态的稳定对α-乳清蛋白折叠机制的影响：牛和人α-乳清蛋白嵌合体的研究

• 发表时间: 2005
• 期刊: Proteins 61
• 作者: 内田 諭;杤久保 文嘉;渡辺 恒雄;T.Ichitsubo;Safwat Hassaballa;Safwat Hassaballa;Safwat Hassaballa;Safwat Hassaballa;村岡克紀;M.Kubo;M.Shibata;T.Sasaki;M.Mizuguchi
• 通讯作者: M.Mizuguchi

Effect of Hydrostatic Pressure on Conformational Changes of Canine Milk Lysozyme between the Native, Molten Globule, and Unfolded States

静水压力对犬乳溶菌酶在天然状态、熔球状态和展开状态之间构象变化的影响

• 发表时间: 2004
• 期刊: Biochim.Biophys.Acta 1702
• 作者: I.Ohmukai;H.Takeda;M.Hamasaki;K.Numa;S.Adachi;T.Nakamura;M.Demura;M.Sato;M.Mizuguchi;M.Kubo;M.Yoshida et al.;M.Watanabe et al.
• 通讯作者: M.Watanabe et al.

Photobleaching of Bacteriorhodopsin Solubilized with Triton X-100

• DOI: 10.1562/2005-03-22-ra-470
• 发表时间: 2005-09
• 作者: Takanori Sasaki;M. Sonoyama;M. Demura;S. Mitaku

Disassembling and Bleaching of chloride-free pharaonis halorthodopsin by octyl-beta-glucoside

辛基-β-葡萄糖苷对无氯雉盐视紫红质的分解和漂白

• 发表时间: 2005
• 期刊: Biochemistry 44
• 作者: 内田 諭;杤久保 文嘉;渡辺 恒雄;T.Ichitsubo;Safwat Hassaballa;Safwat Hassaballa;Safwat Hassaballa;Safwat Hassaballa;村岡克紀;M.Kubo
• 通讯作者: M.Kubo

Hydrogen-bonding alterations of the protonated Schiff base and water molecule in the chloride pump of Natronobacterium pharaonis.

• DOI: 10.1021/bi050726d
• 发表时间: 2005-08
• 期刊: Biochemistry
• 影响因子: 2.9
• 作者: Mikihiro Shibata;N. Muneda;Takanori Sasaki;K. Shimono;N. Kamo;M. Demura;H. Kandori