決定直後マウス生殖細胞に発現する遺伝子の網羅的解析

测定后立即全面分析小鼠生殖细胞表达的基因

基本信息

批准号：
16045217
负责人：
斎藤通紀
金额：
$ 3.84万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

代表研究者らは、単一細胞レベルでのマウス生殖細胞決定機構の解析系を立ち上げ、生殖細胞決定の際におこる分子生物学的変化を捉える基礎を作り上げた。これをさらに発展させる目的で、我々は単一細胞から偏りなくかつ再現性良く発現遺伝子を増幅し、High density oligonucleotide microarrayにて正確に解析する系を確立、発生3.5日目のマウス胚盤胞が2種の細胞からなることを証明した(Kurimoto et al., Nuc.Acids Res.In the press)。この方法を用いて、発生7.5日目の決定後生殖細胞とその起源を同じくするものの体細胞へと分化した細胞群の遺伝子発現を単一細胞レベルで比較した結果、生殖細胞は特異的な蛋白質リン酸化酵素群、細胞接着因子群を発現し、DNA methyltransferase活性を抑え、また重要なことに形態生成やpattern formationに関わる因子群の発現を強力に抑制していることが判明した。さらに生殖前駆細胞から、時系列に沿い、生殖細胞が決定される過程で起こる遺伝子発現動態の変遷を詳細に解析することに成功し、現在そのデータを検証している。また生殖細胞の最初期に特異的な発現を示し、その決定に重要な役割を果たす遺伝子Blimp1を同定した(Ohinata et al., 2005)。Blimp1欠損生殖細胞からの単一細胞cDNAも作成しており、これを解析することで、Blimp1の生殖細胞形成における役割を決定しつつある。

领先的研究人员在单细胞水平上启动了一种用于小鼠生殖细胞测定机制的分析系统，为捕获生殖细胞测定过程中发生的分子生物学变化创造了基础。为了进一步发展，我们建立了一个用于扩增无偏见和单个细胞可重复性的系统的系统，并使用高密度寡核苷酸微阵列准确地分析它们，表明第3.5天小鼠胚泡由两个细胞组成（Kurimoto et al。使用这种方法，我们比较了使用该方法的单个细胞水平，比较了相同来源的生殖细胞和相同原点细胞的基因表达。我们发现生殖细胞表达特定的蛋白质磷酸酶和细胞粘附因子，抑制DNA甲基转移酶活性，并强烈抑制涉及形态发生和模式形成的因子的表达。此外，我们已经成功地详细分析了在时间序列中从生殖器祖细胞确定的生殖细胞过程中发生的基因表达动力学的变化，目前正在验证该数据。我们还确定了基因Blimp1，该基因在最早的生殖细胞中表现出特定的表达，并在确定它中起重要作用（Ohinata等，2005）。我们还从Blimp1缺陷型生殖细胞中创建了单细胞cDNA，并且通过分析它们，我们开始确定Blimp1在生殖细胞形成中的作用。

项目成果

期刊论文数量（11）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Germline recruitment in mice : A genetic program for epigenetic reprogramming.

小鼠种系招募：表观遗传重编程的遗传程序。

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
Ernst Schering Research Foundation Workshop 60 60
影响因子：
0
作者：
Ohinata;Y.;Seki;Y.;Payer;B.;O'Carroll;D.;Surani;M.A.;Saitou;M.
通讯作者：
M.

An improved single-cell cDNA amplification method for efficient high-density oligonucleotide microarray analysis.

一种改进的单细胞 cDNA 扩增方法，用于高效的高密度寡核苷酸微阵列分析。

DOI：
10.1093/nar/gkl050
发表时间：
2006
期刊：
Nucleic acids research
影响因子：
14.9
作者：
Kurimoto K;Yabuta Y;Ohinata Y;Ono Y;Uno KD;Yamada RG;Ueda HR;Saitou M
通讯作者：
Saitou M

Mechanism of mouse germ cell specification : A genetic programme regulating epigenetic reprogramming

小鼠生殖细胞特化的机制：调节表观遗传重编程的遗传程序

DOI：
发表时间：
期刊：
69^<th> Cold Spring Harbor Symposium on Quantitative Biology (posted online on October 29,2004,(doi:10.1101/sqb.2004.69.040)) 69(発表予定)
影响因子：
0
作者：
Surani;M.A.;Ancelin;K.;Hajkova;P.;Lange;U.C.;Payer;B.;Western;P.;Saitou;M.
通讯作者：
M.

Analysis of Esg1 expression in pluripotent cell and the germline reveals similarities with Oct4 and Sox2, and differences between human pluripotent cell lines.

对多能细胞和种系中 Esg1 表达的分析揭示了与 Oct4 和 Sox2 的相似性以及人类多能细胞系之间的差异。

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Stem Cells 23
影响因子：
0
作者：
Western;P.;Maldonado-Saldivia;J.;van den Bergen;J.;Hajkova;P.;Saitou;M.;Barton;S.;Surani;M.A.
通讯作者：
M.A.

Extensive and orderly reprogramming of genome-wide chromatin modifications associated with specification and early development of germ cells in mice

DOI：
10.1016/j.ydbio.2004.11.025
发表时间：
2005-02-15
期刊：
DEVELOPMENTAL BIOLOGY
影响因子：
2.7
作者：
Seki, Y;Hayashi, K;Matsui, Y
通讯作者：
Matsui, Y

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斎藤通紀其他文献

炭素・窒素安定同位体比によるDHSリアクターにおける食物連鎖網の評価

使用碳/氮稳定同位素比评估 DHS 反应堆中的食物链

DOI：
发表时间：
2013
期刊：
影响因子：
0
作者：
T.Matsumoto;T.Hoshino;Y.Akiyama;K.Morishima;A. N. Hattori;北岡卓也;斎藤通紀;小野寺崇，金谷弦，珠坪一晃，宮岡佑馬，宮地賢一，幡本将史，山口隆司
通讯作者：
小野寺崇，金谷弦，珠坪一晃，宮岡佑馬，宮地賢一，幡本将史，山口隆司