酵母並びにヒト細胞における相同組換えの分子メカニズムとゲノム安定化

酵母和人类细胞同源重组和基因组稳定的分子机制

• 批准号: 17012016
• 负责人: 篠原 彰
• 金额: $ 6.21万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17012016/
• 关键词: 相同組換え; DNA修復; ゲノム安定化; 酵母

相同組換えはDNA-染色体の間の交換反応であり,体細胞分裂期にはDNA2重鎖切断の修復に、減数分裂期には染色体の分配に重要な役割を果たす。体細胞分裂期の組換えの破綻はゲノムの不安定化を導き,.細胞の癌化の原因になると考えられる。真核生物の相同組換えの分子機構を理解する事は癌化の原因のゲノム不安定化を理解に繋がる事が期待出来る。酵母の組換えの反応,特に細胞、核内での組換えに関わる蛋白質の局在と挙動を解析するために,細胞内で生じるたった1カ所の組換え反応を解析する系を構築した。DNA結合蛋白質にGFPを融合した蛋白質の結合配列を近傍に持たせる事で,組換え反応の部位を可視化するようできた。この部位への蛋白質の集合反応を解析したところ,組換えにはRad51のようなRecAホモログが単独で機能するのではなくRad52のような他の因子が協調的に複合体を形成する事,つまり巨大な超分子複合体として相同鎖検索反応を行っている事が分かった。また、クロマチン免疫沈降法を用いることにより、DNA2重鎖切断末端の両側で,組換えに関わる蛋白質の局在が等価ではないことも判明した。今後はさらに詳しい解析をすることで、組換えの分子メカニズムの詳細な解明を目指した。特定領域の組換え反応を可視化する系を、ヒト培養細胞においても酵母同様に構築すること平行して目指しているが,DNA2重鎖切断を導入する効率が悪い事が大きな問題になった。この間題を克服するために,最近開発された蛋白質のデリバリーシステムを用いて,制限酵素を導入する事で、特定領域に組換えを誘発する事を検討した。

In the same tissue, the cross between chromosomes of DNA- was reversed, the DNA2 of somatic cells was cut and repaired, and the distribution of chromosomes in mitotic cells was important. During the period of cell division, the tissue tissue breaks down and becomes unstable and stable. The cause of cellular cancerization has been investigated. In eukaryotes, the same tissue is involved in molecular mechanisms that understand the causes of cancerization, anxiety, anxiety, and anticipation. Yeast tissue reaction, special cellular and nuclear tissue protein analysis, enzyme analysis, intracellular enzyme analysis, enzyme analysis, enzyme analysis. DNA binding protein, GFP protein, fusion protein, protein and protein. In this part of the body, Rad51 proteins were collected and analyzed by reverse analysis, and the system was used to detect the formation of a complex of other factors in the coordination of Rad52 and other factors. in this way, the giant supramolecular complex, the same supramolecular complex, the same chain, the same chain, the same sequence, the same sequence. Immuno-sedimentation method was used to cut the end of the tumor with the help of DNA2, and then the protein was identified in the tissue test. In the future, we will analyze the information and organize the components to understand the target information. In a specific field, the system can be changed, and the system can be improved. The yeast is parallel to the system, and the DNA2 is used to reduce the frequency of production. In order to overcome the problems, we have recently opened a new method for the production of protein and protein products, which restricts the use of enzymes in the production of food products, and that of specific field organizations.

项目成果

減数分裂期の相同組換えに働く新規蛮白質複合体の機能

一种在减数分裂过程中同源重组中发挥作用的新型白质复合物的功能

• 发表时间: 2005
• 期刊: 生物物理 印刷中
• 作者: 小根山千歳;飯野琢也;斎藤一伸;鈴木慶;岡田雅人;篠原 彰;Sei-ichi Tanuma;篠原 彰;篠原 彰
• 通讯作者: 篠原 彰

減数分裂期において相同染色体間の組換えを促進する新規複合体

一种在减数分裂过程中促进同源染色体重组的新型复合物

• 发表时间: 2005
• 期刊: 実験医学 23
• 作者: 小根山千歳;飯野琢也;斎藤一伸;鈴木慶;岡田雅人;篠原 彰
• 通讯作者: 篠原 彰

減数分裂期のDNAの交換反応

减数分裂过程中的DNA交换反应

• 发表时间: 2005
• 期刊: 生化学 77
• 作者: 小根山千歳;飯野琢也;斎藤一伸;鈴木慶;岡田雅人;篠原 彰;Sei-ichi Tanuma;篠原 彰
• 通讯作者: 篠原 彰

Isolation and characterization of novel Xrs2 mutation In Saccharomyces cerevisiae

酿酒酵母中新 Xrs2 突变的分离和表征

• 发表时间: 2005
• 期刊: Genetics 170
• 作者: 飯野琢也;小根山千歳;岡田雅人;田沼 靖一;Shima K
• 通讯作者: Shima K