テトラサイクリン依存性転写制御システムを利用した神経細胞のマーキング

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脳機能の解析を進める上で、特定の脳部位におけるある神経細胞群をマークし、その神経細胞全体(すなわち樹状突起、細胞体、軸索)あるいは一部の機能部位を可視すること、電位変化や伝達物質放出状態をモニターすること、さらにはその細胞群で特定の機能分子を導入あるいは抑制することができれば、それは非常に強力な解析ツールとなる。本研究は、テトラサイクリン依存性転写制御システムを利用して特定の神経細胞群をマークすることにより、効率よくかつ再現よく、神経細胞の可視化、活動性のモニタリング、機能分子の操作を可能にするツールの開発を目的とする。線条体の投射神経細胞であるmedium spiny neuron (StMSN)選択的にtTA (tetracycline-controlled transactivator:テトラサイクリン制御性トランス活性化因子)を発現するマウスライン(StMSN-tTA)をtTA driver lineとして使用し、このマウスとtetO(テトラサイクリン依存性プロモーター)-"X" responder lineマウスを交配させることにより、線条体medium spiny neuronに効率よく種々の分子"X"を発現させることを試みている。これまでに、tetO-nlacZ (nuclear localization signal - lacZ), tetO-EGFP, tetO-EYFP, tetO-ECFP, tetO-DsRed.T3 (DsRed-express),tetO-synaptopHluorin (VAMP2 - pH sensitive GFP variant)トランスジェニックマウスを作成した。これらのマウスとStMSN-tTAマウスとの交配により得られたダブルトランスジェニックマウスを用いて導入分子の発現を解析した。