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神経細胞樹状突起へのトランスポートを誘導するアミノ酸候補配列の遺伝学的検証

诱导转运至神经元树突的候选氨基酸序列的遗传验证

基本信息

批准号：
18059015
负责人：
横井峰人
金额：
$ 2.62万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

培養神経細胞での実験により、樹状突起へのソーティングシグナルとして報告されているフラグメント、すなわち、トランスフェリン受容体のN末フラグメント、ポリメリックIg受容体のC末フラグメント、低密度リポプロテイン受容体のC末フラグメント、AMPA型グルタミン酸受容体サブユニット1または2のC末フラグメント、をGFPよりも強い蛍光を示し且つ広い範囲のpHに安定な蛍光分子であるVenusと融合させたハイブリッド遺伝子を作成した。これらのハイブリッド遺伝子をテトラサイクリン依存性プロモーター(tetO)の下流に導入したトランスジェニックマウス(tetO-"X-Venus")を作成し、Striatum-tTAマウスとの交配により、"X-Venus"を線条体medium spiny neuron(MSN)に発現させることを試みた。しかしながら、線条体MSNに選択的かつ十分量のトランスジーンを発現するマウスラインを得ることができなかった。このため、線条体MSNのうちで、嗅結節MSNの樹状突起におけるVenusの発現を詳細に観察し、トランスフェリン受容体のN末フラグメント、ポリメリックIg受容体のC末フラグメント、低密度リポプロテイン受容体のC末フラグメント、AMPA型グルタミン酸受容体サブユニット1または2のC末フラグメント、が嗅結節MSNにおける樹状突起へのソーティングに十分であるかどうか、さらには、これらが、樹状突起の機能的サブコンパートメントであるIa層とIb層とで異なった分布を誘導するソーティングシグナルとして機能するかどうかを明らかにすることは、できなかった。

In culture of neurons, dendrites and dendrites are used to report on the N-terminal of receptors, C-terminal of Ig receptors, C-terminal of low-density receptors, AMPA-type acid receptors, C-terminal of 1 - 2, and C-terminal of 2 - 2. GFP is a powerful light source and a stable light source. This is the case with Striatum-tTA,"X-Venus," a linear medium spiny neuron(MSN). The number of entries in the MSN selection list is 10. The occurrence of Venus in the dendrites of the olfactory node MSN is examined in detail. The N terminal of the receptor, the C terminal of the Ig receptor, the C terminal of the low density receptor, the AMPA type acid receptor, the C terminal of the 1 terminal of the 2 terminal of the 3 terminal of the 4 terminal of the 3 terminal of the 4 terminal Odor node MSN dendrites are very functional. Layer Ia and Layer Ib are different. Distribution of dendrites is induced. Function is induced.