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細胞内遺伝子診断のための蛍光性インテリジェント核酸塩基の開発

用于细胞内遗传诊断的荧光智能核碱基的开发

基本信息

批准号：
17034059
负责人：
齋藤烈
金额：
$ 2.69万
依托单位：
Nihon University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

蛍光を使って細胞内で遺伝子を検出するためには、検出すべきターゲット遺伝子と対になった時のみ蛍光を発し、ターゲット以外の遺伝子やそれ自身単独では全く蛍光を出さないようなきわめてインテリジェントな蛍光分子を含むDNAプローブの開発が必要となってくる。我々は最近、特定の核酸塩基と対になった時のみ蛍光を発する蛍光核酸塩基BDFをデザインするコンセプトを提唱しそれを実証した。BDFを使えば細胞内での遺伝子検出を蛍光でおこなうことが原理的には可能となり、我々の独創的なコンセプトを生かして、実用に耐えるような細胞内蛍光遺伝子検出法を本特定研究で開発することを目的とする。BDFデザインの基本原理は、溶媒の極性にきわめて鋭敏な蛍光色素分子をDNA塩基の一部に組み入れ、特定の対塩基とペアになった時にのみ、強い蛍光を発するように分子デザインすることである。BDFを用いることより、細胞内での遺伝子の有無を蛍光で判別したり、細胞内での遺伝子の1塩基変異を解析するための基礎的ならびに応用的研究を行う。そのためには、先ず第一に、細胞内を透過できる550nm(出来れば600nm)以上の蛍光を発し、なおかつ塩基識別能を有するBDFの開発を行った。既に、候補となるBDFをいくつか合成しているので、その性能を調べた後、実際の細胞系でターゲットとなる遺伝子の検出と1塩基多形(SNP)のタイピングを行った。その際、時間分割蛍光測定あるいは共焦点蛍光顕微鏡による測定なども検討する。どのような波長でどれくらいの寿命の蛍光分子が細胞内で最適かを検討した。これまで、アクリドン、プロダン、アントラセンなどを含む長波長で蛍光を発するBDF分子の開発に成功した。

The light is used to cause the intracellular microphone to switch off the light, to turn on the light when the device is off, and to turn on the light of its own when it is not. The DNA is used to open the necessary light. Recently, a specific nucleic acid base has been used to detect the photonucleic acid (BDF). The BDF makes it possible that the principle of photoluminescence in the cell may be affected, and that we may use the method of radiation tolerance in the cell. The purpose of this specific study is to improve the effectiveness of this study. The basic principles of BDF, solvent-sensitive photosensitive light pigment molecules, the introduction of light pigment molecules, the introduction of DNA molecules, the introduction of light-sensitive light pigment molecules, the introduction of light-sensitive light pigment molecules, the introduction of photosensitive light-sensitive light pigment molecules, the introduction of photosensitive photosensitizer, photosensitive molecular photosensitizer, photos BDF is used to analyze the use of antigens in the study of the use of antigens in the detection of microorganisms, the detection of intracellular antigens, and the analysis of the use of antigens. You will be able to use the BDF to start the operation on the first day, the first day, and the first day, the first time, the first time, the first After the synthesis of BDF genes and performance tests, the cell lines were analyzed in terms of genetic polymorphisms (SNP), phenotypes, and cell lines. International and time-divided photometric measurements are used to determine the accuracy of the optical micrometer system. The wavelength and lifetime of photoluminescence are the most sensitive in the cell. Long-term, long-term, long-term,