転写因子Bach2によるB細胞活性化応答遺伝子プログラムの解明

转录因子 Bach2 阐明 B 细胞激活反应基因程序

基本信息

批准号：
17047026
负责人：
武藤哲彦
金额：
$ 4.67万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

転写因子Bach2は、ノックアウトマウスの解析から、B細胞の活性化応答で重要な役割を担うことが予想された。平成18年度は、Bach2がBlimp-1遺伝子を抑制するという遺伝子プログラムのB細胞活性化応答での生理的意義の解明を目指した。第一に、形質細胞分化における役割を検討した。そこで、Blimp-1遺伝子の発現細胞をEGFPの蛍光でモニターできるレポーターマウスとBach2ノックアウトマウスを交配した。同マウスから採取したB細胞に対し、形質細胞分化の誘導をおこなった。その結果、Bach2ノックアウトB細胞集団からは、Blimp-1遺伝子を発現し(EGFP陽性)、形質細胞分化マーカー陽性の細胞が高頻度に出現するという結果を得た。また、Bach2ノックアウトB細胞では、野生型B細胞に比べて少ない分裂回数から高頻度に形質細胞分化への分化が誘導された。以上の結果から、Bach2/Blimp-1遺伝子プログラムは形質細胞分化の頻度を抑制的に調節すると考えられる。Blimp-1は、形質細胞分化を促進するとともに、抗体のクラススイッチ(CSR)を抑制することが知られている。そこで第二に、CSRでの同遺伝子プログラムの役割を検討した。Bach2とBlimp-1のノックアウトマウスを交配し、ダブルノックアウトマウスを作成した。このとき、ダブルノックアウトB細胞ではBach2ノックアウトB細胞のCSR障害が救済されるた。すなわち、Blimp-1遺伝子の過剰な発現がBach2ノックアウトB細胞のCSR障害の原因であることを明らかにした。本研究で、Bach2/Blimp-1遺伝子プログラムはB細胞の活性化応答で形質細胞への分化頻度を抑制し、B細胞にCSRを実行させるという重要な機能を有することが示唆された。

预测转录因子Bach2在敲除小鼠分析中B细胞的激活反应中起重要作用。在2006年，我们旨在阐明基因程序的生理意义，其中Bach2在B细胞激活反应中抑制了BACH2抑制Blimp-1基因。首先，检查了浆细胞分化中的作用。因此，将可以通过EGFP荧光监测的记者小鼠与Bach2敲除小鼠交叉。血浆细胞分化是从同一小鼠收集的B细胞上诱导的。结果，表达Blimp-1基因（EGFP阳性）和阳性浆细胞分化标记物的细胞经常来自Bach2基因敲除B细胞群。此外，Bach2基因敲除B细胞诱导出更高的分化频率为浆细胞分化，而分裂少于野生型B细胞。基于上述结果，认为Bach2/Blimp-1基因程序抑制了浆细胞分化的频率。已知Blimp-1可以促进浆细胞分化并抑制抗体的类切换（CSR）。其次，我们研究了等遗传程序在CSR中的作用。将Bach2和Blimp-1淘汰小鼠配对以形成双基因敲除小鼠。此时，双基因敲除B细胞挽救了Bach2基因敲除B细胞中CSR损伤。也就是说，揭示了Blimp-1基因的过度表达是造成Bach2基因敲除B细胞中CSR损伤的原因。这项研究表明，Bach2/Blimp-1基因程序具有抑制B细胞活化反应中分化为浆细胞的频率并允许B细胞执行CSR的重要功能。