权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

キメラ菌体を用いたバクテリアべん毛モーターの回転計測

使用嵌合细菌细胞测量细菌鞭毛马达的旋转

基本信息

批准号：
17049016
负责人：
石島秋彦
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Tohoku University (2006)Nagoya University (2005)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

バクテリアべん毛モーターは直径が高々40nmの回転モーターであり,バクテリアの運動機関として知られている.その原動力は,細胞内外のイオン濃度差であり,種により,プロトン,ナトリウムが用いられる.我々はこれら2種類のキメラ菌体を作成した.このキメラ菌体は,回転計測に適しており,回転機構の解明に重要な役割を果たす.また,バクテリア菌体内における情報のやりとり,モーター複合体の構築状況,モーターの回転の様子を明らかにするためには,菌体内の分子のイメージング技術が必須となる.菌体内のイメージングに関しては,従来のイメージング技術に比べて,菌体の小ささ(約2ミクロン,従来の細胞は10数ミクロン),さらには菌体が俵型をしていることからの光学的という問題がある.我々はエバネッセント照明を最適化し,バクテリア菌体内のGFP融合タンパクのイメージングを試みた.その結果,モーター構成タンパクの一つであるFliGとGFPの融合タンパクが菌体内を拡散運動している様子を観察することに成功した.さらに,蛍光輝点の重心解析により,拡散定数を見積もることに成功した.また,テザードセル法を導入することで菌体の回転中心とFliG-GFP融合タンパクとの輝点が一致することを明らかにすることができた.しかしながら,GFPのイメージングには退色という大きな壁が存在する.一般的にGFPの観察は約10秒程度で蛍光が退色するために,長時間の観察には適さない.そこで,我々は,ストロボ撮影を試みた.ストロボ撮影により,従来より10倍以上の観察時間を得ることができた.さらに,露光時間をビデオレートより非常に短くすることにより,従来では観察不可能であった早い拡散運動をとらえることが可能となった.

This is the most important thing to know that the diameter of the machine is very high, and that the 40nm is very high. The original kinetic force, the difference of temperature between inside and outside of the cell, the temperature difference between inside and outside of the cell, the amount of gas in the cell, the temperature, the temperature, and the temperature. We do not know how to make a strain of bacteria like this. If you want to use the bacteria, you will need to return to the organization to explain the importance of cutting the fruit. The situation in the bacteria is not affected, and the condition of the complex is abnormal. The molecular DNA in the bacteria must be affected. In the body of bacteria, there are significant differences in the number of bacteria, the number of bacteria, the size of the cells, the number of cells, We need to know that the lighting is optimized, and that the GFP fusion in the bacteria is the best. According to the results of the test, the FliG GFP fusion bacteria in vivo were successfully detected and the results showed that they were successful. The center of gravity of the center of gravity of the light point is analyzed, and the scatter number is known to be successful. In the center of the FliG-GFP fusion, the cells were fused, the cells were fused, and the points were consistent. Please tell me that the color has faded, and that there is a problem in the wall of the GFP. The general GFP monitoring is about 10 seconds, and the color of the light is fading, and it is monitored for a long time. I'm sorry, I'm sorry. In order to get more than 10 times the inspection time, you will get more than 10 times the inspection time. During the weather, the exposure time is very short, so it is not possible to detect that it is not possible to do so in the morning.