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分子モーターの1分子ナノマニピュレーションによるエネルギー変換メカニズムの解明

通过分子马达的单分子纳米操纵阐明能量转换机制

基本信息

批准号：
10175215
负责人：
石島秋彦
金额：
$ 1.86万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

生体内において,一番よく知られている分子モーターは筋肉内のアクチン・ミオシンである.この系は昔から盛んに研究が行われている.しかし,他の分子モーター,細胞内輸送タンパク質,生体膜上に存在するエネルギー変換タンパク質はその収量が非常に少ない,という問題に加えて,これら生体膜上で働くタンパクは生体膜に組み込まれて本来の機能を発揮できるのため,今までの研究方法のようなガラス上に固定して観察する,という方法では生体内に近い系での観察は困難である.我々は,新しい計測システムを開発するために,人工平面膜に着目した.人工平面膜は主に電機生理の研究で使われてきた技術であり,2つの接したチャンバーの境界に微少な穴(直径約100mm)をあけ,そこに脂質二重膜の形成・イオンチャンネルの組み込みをおこなうことにより,従来のパンチクランプ法より自由度を持った計測システムである.このシステムは電機生理を主な目的とした系であるので,我々の目的である,運動タンパク質1分子を観察・操作・計測するにはそのままでは不十分である.従って,我々は光学顕微鏡上で人工平面膜を形成することを試みている.光学顕微鏡上で観察・操作・計測可能な人工平面膜を作成するには,・対物レンズで観察可能な状態(ステージに対して,平行に)で形成する.・底面から中数ミクロン程度の距離に形成する.・蛍光観察のため自家蛍光などがない状態で形成する.・人工平面膜の上下環境が独立である.・溶液交換などの自由度がある.・平面膜形成が簡単に行える.などが要求される.現在,このような要件を満たすシステムを開発中である.このシステムの開発が成功すれば,・べん毛モーターの回転とイオンの流れの直接観察・F1FOの回転とイオンの流れの直接観察・膜接着型運動タンパク質,ミオシンIの運動の観察,機能解明など様々な分野に応用していきたい.

In the body, you have to know that the molecules are so tight that you don't know how to do it. In the past, there was a lot of research in the past. There is a very small amount of DNA on the body membrane, which is very small, and the problem is that the temperature on the body membrane is very low, and the temperature on the body membrane is very small. In this paper, the methods of research are used to observe the problems in vivo, in vivo and in vivo. We hope that the new system will be used for the first time, and the artificial plane film will be more suitable. The artificial plane membrane is used in the computer physiological research system, which makes it possible to apply the artificial planar membrane to the computer physiological system. In the second half of the year, there are a small number of holes (about 100mm in diameter) in the field of mechanical technology, and the double membrane is used to form a high-performance membrane. The main purpose of computer physiology is not very important. We do not know how to do this. We do not know how to do molecular surveillance operation. The artificial plane film is formed on the optical micrometer. On the optical micrometer, the operation plan may be made of the artificial plane film, and the object may be in a state (parallel). The bottom surface is far away from the median to form a distance. The light observes that the light in your own house is in the form of a light. Artificial plane film is independent of the upper and lower environment. The degree of freedom of the solution is different. The plane film forms a thin film. Please ask for help. At present, the important requirements are in the process of opening. The system has been successfully opened, and the F1FO system has been used to monitor the data flow directly. The direct monitoring film is used to monitor the monitoring system, and the monitoring system can be used to understand the application of the monitoring system.