蛍光相関分光法を用いた細胞核内ダイナミクスの解析
使用荧光相关光谱分析细胞内动力学
基本信息
- 批准号:17050001
- 负责人:
- 金额:$ 4.61万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
- 财政年份:2005
- 资助国家:日本
- 起止时间:2005 至 2006
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本研究の目的は蛍光相関分光法(FCS)とまたはさらに一歩進んだ2点同時測定FCS等を利用して、核内の分子運動の特性を解析し、これまでのイメージング手法では明らかにできなかった核の機能と密接関連したダイナミックな機構が存在する事を明らかにすることである。前年度に引き続き核内におけるGR-GFPの詳細な解析を行った。その結果、これまでに細胞質内ではDex(Dexamethasone)添加前後でGRの拡散定数に変化が生じなかったのに対し、核内ではDex添加前後で1.61μm2/sから0.27μm2/sと、拡散定数にして6倍程度遅い成分が生じることがわかった。GRは核内で転写共役因子と複合体を形成していることが知られているが、得られた拡散定数から分子量を算出したところ、今までに知られている複合体の分子量よりはるかに大きな値となった。このことはGRは転写複合体を形成するだけでなく、むしろ核内でさらに大きな構造体と相互作用していることを示唆している。さらに欠損変異体の結果は、wild type GRは核内でGRE、あるいは転写共役因子と相互作用することで比較的安定な転写複合体を形成し、最終的に二量化することで転写調節が開始されるというステップを示唆している結果を得つつある。公募班員である小布施力史博土と蛍光相関分光を用いた蛍光標識Misl2タンパク質の核内における分子動態の測定を開始した。変異体、ならびにワイルド型では細胞室内で拡散定数に変化があることを明らかにした。研究課題を遂行するためには既設の装置を利用して、測定領域を高速に動かすことで擬似的ではあるが、多点測定が可能であること、または、全反射光学系を用いて可能性があることがわかった。
The purpose of this study is to analyze the molecular motion characteristics in the nucleus by using FCS and to determine the relationship between the function and the structure of the nucleus. The detailed analysis of GR-GFP in the core of the previous year was conducted. The results showed that the number of GR in cytoplasm changed from 1.61μm2/s to 0.27μm2/s before and after Dex(Dexamethasone) addition, and the number of GR in nucleus changed from 1.61μm2/s to 6 times before and after Dex addition. The molecular weight of the complex is calculated by using the molecular weight of the complex The formation of the complex is a process of structural interaction within the nucleus. The result of the loss variation is that the wild type GR is the core GRE, the interaction factor is the core GRE, and the interaction factor is the core GRE. The measurement of molecular dynamics in the nucleus of the nucleus by fluorescence correlation spectroscopy The number of cells in the cell is different from that in the cell. The research topic is to use the device to measure the high speed of the image.
项目成果
期刊论文数量(19)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Control of the optical properties of quantum dots by surface coating with calix[n]arene carboxylic acids
- DOI:10.1021/ja062021k
- 发表时间:2006-07-26
- 期刊:
- 影响因子:15
- 作者:Jin, Takashi;Fujii, Fumihiko;Kinjo, Masataka
- 通讯作者:Kinjo, Masataka
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- DOI:
- 发表时间:2006
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Yasutomo Nomura;Hirobumi Fuchigami;Hiroaki Kii;Zhonggang Feng;Takao Nakamura;Masataka Kinjo
- 通讯作者:Masataka Kinjo
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- DOI:
- 发表时间:2006
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Y.Ohsugi;M.Kinjo
- 通讯作者:M.Kinjo
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- DOI:10.1039/b506608e
- 发表时间:2005-01-01
- 期刊:
- 影响因子:4.9
- 作者:Jin, T;Fujii, F;Kinjo, M
- 通讯作者:Kinjo, M
Analysis of cellular functions by multipoint fluorescence correlation spectroscopy
多点荧光相关光谱分析细胞功能
- DOI:
- 发表时间:2005
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Takahashi Y;Sawada R;Ishibashi K;MikuniS;Kinjo M.
- 通讯作者:Kinjo M.
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