老化に特異な新規構造体Rubisco-containing bodyの特性解析

含 Rubisco 体的表征，这是一种独特的衰老结构

• 批准号: 17051002
• 负责人: 前 忠彦
• 金额: $ 3.84万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17051002/
• 关键词: シロイヌナズナ; Rubisco; Rubisco-containing body; 老化; オートファジー

葉緑体ストロマにターゲットされるGFPやDsRedを発現するシロイヌナズナ(CT-GFP,CT-DsRed)の緑葉を用いて、RCBの生細胞における可視化法について検討した。葉を個体から切離後、コンカナマイシンAあるいはE-64dを浸透させインキュベートすると、処理後10時間あたりからGFP蛍光をもつ小胞が液胞内に蓄積した。またCT-DsRedでも同様の結果が得られた。これらの小胞は直径が1μm前後でクロロフィルの自家蛍光を持たないなど、電顕におけるRCB像とよく似た特徴を有していた。抗GFP抗体及び抗RbcL (Rubisco-lATGe subunit)抗体を用いた二重免疫電顕による解析の結果、GFP小胞がRCBであることが確認された。このRCBの生細胞における可視化法を用いて、RCBの蓄積とオートファジー機構との関連性について調べた。その結果、オートファジーに必須の遺伝子ATGの欠損変異体(atg5-1)では、RCBの蓄積は全く見られないことがわかった。その代わりに、atg5-1では飢餓条件下でのインキュベート後、葉肉細胞において葉緑体から突出する管状の構造体、ストロミュールが出現していた。次にCT-DsRedとautophagosomeやautophagic bodyのマーカーであるGFP-ATG8aを共発現する形質転換体を用いて蛍光2重染色による解析を行った。阻害剤の存在下でインキュベートした葉では、CT-DsRedが葉緑体に加えて、液胞に存在するGFP-ATG8aで可視化された小胞、すなわちautophagic bodyにも局在することがわかった。またGFP-ATG8は稀に観察される短い球状のストロミュールにも局在していた。これらの結果から、RCBの蓄積はATGに依存したオートファジー機構により進行していることが示された。

Chloroplasts, GFP, DsRed, CT-GFP,CT-DsRed, green leaves, RCB, green cells, green leaves, green leaves. After the leaf is cut off, the GFP light is accumulated in the cytosol 10 days after the treatment. CT-DsRed is the same result. The diameter of the cell is 1μm, and the characteristics of the RCB image are similar. The results of double immunoassays using anti-GFP antibodies and anti-RbcL (Rubisco-lATGe subunit) antibodies confirmed that GFP cells were RCB positive. The application of RCB in cell culture, the accumulation of RCB in cell culture, and the correlation between RCB and cell culture are discussed. The result of the test is that RCB must be stored in ATG (atg5-1). In addition, atg5 -1 can be used under starvation conditions, and tubular structures protruding from the chloroplasts in mesophyll cells appear. CT-DsRed and autophagosomes were analyzed by GFP-ATG8a co-generation. In the presence of inhibitors, GFP-ATG8a visualizes the presence of chloroplasts and mitochondria, and the presence of autophagic bodies. The GFP-ATG8 is a short, round, round. The result is that RCB is stored in ATG.

项目成果

Effects of nitrogen nutrition on the relationships between the levels of rbcS and rbcL mRNAs and the amount of ribulose 1・5-bisphosphate carboxylase/oxygenase synthesized in the eighth legve of rice from emergence through senescence

氮素营养对水稻第八穗出苗至衰老rbcS、rbcL mRNA水平与核酮糖1·5-二磷酸羧化酶/加氧酶合成量关系的影响

• 发表时间: 2005
• 期刊: Plant Cell Environ., 28
• 作者: Imai;K.;Suzuki;Y.;Makino A;Mae T.
• 通讯作者: Mae T.

In vivo fragmentation of the large subunit of ribulose-1,5-bisphoshate carboxylase by reactive oxygen species in an intact leaf of cucumber under chilling-light conditions.

在冷光条件下完整黄瓜叶中活性氧对核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶大亚基的体内断裂。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Plant Cell Physiol., 47(印刷中)
• 作者: Nakano;R.;Ishida;H.;Makino;A.;Mae;T.
• 通讯作者: T.

In vivo fragmentation of the large subunit of ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase by reactive oxygen species in an intact leaf of cucumber under chilling-light conditions

• DOI: 10.1093/pcp/pci245
• 发表时间: 2006-02-01
• 期刊: PLANT AND CELL PHYSIOLOGY
• 影响因子: 4.9
• 作者: Nakano, R;Ishida, H;Mae, T
• 通讯作者: Mae, T

Increased Rubisco Content in Transgenic Rice Transformed with "Sense" rbcS Gene

用“正义”rbcS 基因转化的转基因水稻中 Rubisco 含量增加

• 发表时间: 2007
• 期刊: Plant Cell Physiol. 48(印刷中)
• 作者: Suzuki;Y.
• 通讯作者: Y.

地球生物をささえるルビスコ

Rubisco 支持地球上的生物

• 发表时间: 2006
• 期刊: Journal of Germfree Life and Gnotebiology 36・1
• 作者: Nakano;R.;矢田佳織;前 忠彦
• 通讯作者: 前 忠彦