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微粒子型細胞活動計測プローブの設計とマイクロ流路解析システムの構築

颗粒细胞活性测量探针设计及微通道分析系统构建

基本信息

批准号：
18038018
负责人：
大谷亨
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Toyama Prefectural University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18038018/
关键词：
糖鎖量子ドットデンドリマーミセル蛍光マクロファージ

项目摘要

本研究は、糖鎖修飾した疎水性蛍光分子をハイドロトロピックデンドリマー固定化量子ドット表面に細胞内環境応答結合を介して保持する方法を確立し、細胞表層での糖鎖認識と細胞内へ取り込みをリアルタイムでモニターする微粒子型細胞活動計測プローブの設計を目指して行われた。ポリグリセロールデンドリマー(PGD)にステアリルクロライドとを等モル反応させ、Stearyl PGD-G4を合成した。その上で、Qdot 655 ITK organic quantum dotsのchloroform溶液と、予め100mgのStearyl PGD-G4を溶解した水溶液とを撹拌・混合し、加熱・減圧下にてchloroformを除去してミセル化した。調製したPGD-G4表面コート型Qdot655は水溶性であり、数十nmの粒径であった。また、PGD.G4表面コート型Qdot655にマンノースを導入したところ、水溶性であり、655-660nm付近のシャープな蛍光ピークを得た(励起波長:350nm)。このマンノース導入Qdot655は、培養マクロファージ表層のマンノースレセプターを認識することを、共焦点レーザー顕微鏡観察から確認した。その上で、一酸化窒素検出蛍光試薬を利用して、マクロファージの活性化をフローセルを搭載した蛍光分光器を用いて定量したところ経時的に定量可能であることが見出された。今後は、マイクロ流路を利用した小型化について検討する。

In this study, we established a method for maintaining the intracellular environment binding between the carbohydrate modified and the aqueous fluorescent molecules and designed a microparticle-based cell activity assay for the recognition of the intracellular fluorescent molecules on the surface of the cell. PGD is a combination of PGD and Stearyl PGD-G4. Qdot 655 ITK organic quantum dots chloroform solution, 100mg Stearyl PGD-G4 dissolved in aqueous solution, stirred, mixed, heated, reduced pressure chloroform removed PGD-G4 Surface Qdot655 Water Solubility, Particle Size of Tens of nm PGD.G4 Surface type Qdot655 nm excitation wavelength 655-660nm excitation wavelength 650 nm excitation wavelength 650 -660nm excitation wavelength 650 -660nm excitation wavelength 650 nm excitation wavelength 650 -660nm excitation wavelength 650 -660nm excitation wavelength 650 - 650 nm excitation wavelength 650 Qdot655, culture, microscopical observation The first step is to use a UV detector to detect the presence of UV light. In the future, the flow path will be miniaturized.