ゲノム再プログラム化における体細胞核のダイナミクス

基因组重编程过程中的体细胞核动力学

基本信息

批准号：
19038014
负责人：
多田高
金额：
$ 4.48万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

iPS細胞の出現後、作製技術の開発には目覚ましいものがある。しかし、クロマチン構造が親密に関係する分子機構の解明はほとんど成されていないのが現状である。1) iPS細胞の出現におけるケミカルコンパウンドの効果iPS細胞の作製効率を上げる小分子ケミカルコンパウンドとして以下のものを含むいくつかが報告された。その検証によりクロマチン分子機構の解析を試みた。VPA(Histone deacetylase inhibitor) ; 遺伝子を全体的にアセチル化しオープンクロマチン構造に寄与すると推測された。マウス初代繊維芽細胞(MEFs)を処理すると、副作用で細胞が死滅した。BIX(G9a inhibitor) ; ヒストンメチル化酵素であるG9aの阻害剤で細胞を処理すると、副作用で細胞が死滅した。MEK & GSK3b inhibitors(pluripotent ground state) ; 効果的に再プログラム化を誘導すると言われているが、特殊な培養液との組み合わせが必要であり、その準備を行っている。2) Nanogの再プログラム化における役割MEFsが外来性の因子、Oct4, Sox2, Klf4(c-Myc)によりiPS細胞に再プログラム化される過程における多能性コア因子Nanogの役割を解析する目的で、Nanogの発現をinducibleに調整可能なトランスジェニックマウスの作製に成功した。今後、このマウスを用いて、体細胞のiPS細胞化におけるNanogの役割を明らかにする予定である。

IPS细胞出现后，生产技术的发展出色。但是，目前的情况是几乎没有澄清染色质结构的分子机制。 1）化合物对IPS细胞出现的影响已经报道了几种小分子化合物，包括以下几种化合物，从而提高了IPS细胞的产生效率：通过此验证，我们试图分析染色质分子机制。 VPA（组蛋白脱乙酰基酶抑制剂）；据推测，基因是乙酰化的总体化，并有助于开放染色质结构。小鼠原发性成纤维细胞（MEF）的处理导致细胞被副作用杀死。 BIX（G9A抑制剂）；用G9A的抑制剂（一种组蛋白甲基酶）处理细胞导致细胞死于副作用。 MEK＆GSK3B抑制剂（多能基态）；据说它有效地引起了重编程，但是有必要将其与一种特殊的培养基相结合，并正在做准备。 2）在Nanog重新编程中的作用，分析了多能核心因子Nanog在通过外源因子将MEF重新编程为IPS细胞的过程中的作用，即OCT4，SOX2和KLF4（C-MYC），我们已经成功地创建了可以诱导地调节Nanog表达的转基因小鼠。将来，我们将使用该小鼠来阐明Nanog在体细胞IPS细胞中的作用。