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腸内細菌の病原性・非病原性と抗菌ペプチドの作用機構の解明

阐明肠道细菌的致病性/非致病性以及抗菌肽的作用机制

基本信息

批准号：
19041005
负责人：
綾部時芳
金额：
$ 4.8万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

パネト細胞αディフェンシンペプチドを遺伝子組換え法および合成法により得て、生化学的、構造生物学的および免疫学的基盤を検証した。これらのαディフェンシンを用いて.各種細菌に対する殺菌活性解析を行った。Native Cryptdin4を還元することにより、ジスルフィド結合が殺菌活性に及ぼす影響を検討した。ジスルフィド結合を3組持つCryptdin4(native Crp4) およびnative Cryptdin4をDTTにより還元したCryptdln4(r-Crp4)を調製し、それらのS. typkimurium WT、S. typhimurium phoP-、E. coli ML35およびS. aureusに対する殺菌活性をそれぞれ測定した。その結果、r-Clp4はE.coliに対してのみnative Crp4より有意に強い殺菌活性をペプチド濃度1μg/mlにおいて示したが、その他の細菌に対してはnative Crp4と同等の強力な殺菌活性を認めた。また、両ペプチドの各々の細菌に対する50%阻害濃度(IC50)は有意差を示さなかった。これらの結果より、Crp4のジスルフィド結合は検討した常在菌および非常在菌に対する殺菌活性に直接関与していないことを明らかにした。さらに、Lactobacillus、Bifidobacterium等の常在菌を用いて腸管における排除と共生の分子機構について、細菌側因子と宿主自然免疫作用因子であるαディフェンシンの作用を解析する新たなアッセイ系を確立し、ex vivo腸内環境における共生と排除機構を解析した。本研究により、腸内に常在する非病原性細菌および非常在菌に対して、αディフェンシンのジスルフィド結合が多くの細菌では殺菌活性に関与しないことを明らかにするとともに、腸内の共生と排除に関わる細菌側および宿主側因子の重要性を示唆した。

The cell cycle is characterized by molecular transformation and synthesis, and by biochemical, structural, and immunological analysis. The alpha alpha Analysis of vitamin C activity in various bacteria Native Cryptdin4 is also a source of information and information. Cryptdin4(native Crp4) native Cryptdin4 DTT Cryptdln4(r-Crp4) typkimurium WT、S. typhimurium phoP-、E. coli ML35およびS. Aureus activity was measured. The results showed that r-Clp4 had the same activity as native Crp 4 in E.coli and the concentration was 1μg/ml. The 50% inhibitory concentration (IC50) for each bacterium in the sample was intentionally different. The result is that Crp4 is directly related to the activity of poplar in the presence of bacteria. In addition, Lactobacillus, Bifidobacterium and other commonly used bacteria in the intestinal environment to eliminate symbiotic molecular mechanisms, bacterial side factors and host natural immune response factors to analyze the role of the new system to establish, ex vivo intestinal environment to eliminate symbiotic mechanisms This study demonstrates the importance of bacteria-side and host-side factors associated with the presence of non-pathogenic bacteria in the gut and their association with various bacteria.