ヒト腸上皮の微生物認識機構と内因性抗菌ペプチドによる殺菌機能の分子基盤

人肠上皮微生物识别机制的分子基础及内源性抗菌肽的杀菌功能

• 批准号: 16017208
• 负责人: 綾部 時芳
• 金额: $ 6.02万
• 依托单位: Asahikawa Medical College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16017208/
• 关键词: 自然免疫; 内因性抗菌ペプチド; 粘膜免疫; デフェンシン; 消化管; 腸内細菌; パネート細胞; 微生物認識; Paneth細胞; 微生物

本研究では、ヒト小腸パネート細胞由来の分泌物をRP-HPLCおよび電気泳動法等を用いて分離して、生化学的および免疫学的に解析した。また、われわれの既報で得た小腸陰窩細胞を用いて、パネート細胞および他の腸上皮細胞群におけるToll様受容体や内因性抗菌ペプチドをはじめとする自然免疫関連遺伝子および蛋白の発現を検討することにより、ヒトのパネート細胞の細胞シグナル伝達分子機構を解析した。ヒト小腸パネート細胞にToll様受容体遺伝子または蛋白の発現を認めた。免疫組織学的検討により、Toll様受容体は陰窩の最基底部に発現していた。ex vivo細菌曝露によるヒト小腸パネート細胞分泌系を用いて抗菌活性アッセイを行い、パネート細胞における微生物認識と感染防御機能が関与している可能性を示した。また、単離小腸陰窩と,S.typhimurium, E.coliまたは腸内常在細菌であるLactobacillusをex vivo共培養したところ、検討したいずれの上清中にサルモネラ殺菌活性を認めた。さらに、Western blot解析により、これらの上清中に内因性抗菌ペプチドを認め、各種細菌によるパネート細胞分泌誘導を証明し、微生物感染に対するパネート細胞由来デフェンシンによる感染防御機能を明らかにした。本研究によって、上皮細胞による微生物の認識から内因性抗菌ペプチド分泌およびその殺微生物活性への分子機構を明らかにした。消化管粘膜免疫における自然免疫系が生物学的、免疫学的に重要である可能性を示した。難治疾患と自然免疫、特に内因性抗菌ペプチド関与の解明は、今後の重要なテーマであると考えられた。

This study で は, ヒ ト small intestine パ ネ ー ト cell origin の secretions を RP - HPLC お よ び 気 swimming method such as を with い て separation し て, biochemistry お よ び immunological に parsing し た. ま た, わ れ わ れ の both have reported で を た intestinal Yin nest cells with い て, パ ネ ー ト cells お よ he び の intestinal epithelial cells に お け る Toll others in the capacity of body や endogenous antibacterial ペ プ チ ド を は じ め と す る traces of natural immune masato even 伝 son お よ び protein の 発 を now beg す 検 る こ と に よ り, ヒ ト の パ ネ ー ト cells の シ グ ナ ル 伝 molecular mechanisms Youdaoplaceholder0 parses た. Youdaoplaceholder0 small intestinal パネ <s:1> ト ト cells に toll-like receptor progeny 伝 proteins また are present in を recognition めた. The 検 of immunohistology is によ によ, and toll-like receptors are に at the base of the vulvar gland に and て た た. The ex vivo bacteria exposure に よ る ヒ ト small intestine パ ネ ー ト cell secretion system を with い て antibacterial activity ア ッ セ イ を い, パ ネ ー ト cells に お け る microbes known と infection defenses が masato and し て い る possibility を shown し た. ま た, 単 intestinal Yin nest と, S.t yphimurium, e.c. with our fabrication: oli ま た は intestinal bacteria in で often あ る Lactobacillus を ex vivo trained し た と こ ろ, beg し 検 た い ず れ の supernatant of に サ ル モ ネ ラ bactericidal activity を recognize め た. さ ら に, Western blot parsing に よ り, こ れ ら の supernatant of に endogenous antibacterial ペ プ チ ド を recognize め, all kinds of bacteria に よ る パ ネ ー ト cells induced を prove し, microbial infection に す seaborne る パ ネ ー ト cell origin デ フ ェ ン シ ン に よ る infection defenses を Ming ら か に し た. This study に よ っ て, epithelial cells に よ る microbial の know か ら endogenous antibacterial ペ プ チ ド secretion お よ び そ の microbicide active へ の molecular institutions を Ming ら か に し た. The mucosal immunity of the digestive tract における natural immunity is が biological and immunological に important である possibilities を suggest た た. The と natural immunity of difficult-to-treat diseases, the ペプチド relationship with specific に endogenous antibacterial bacteria, and the <s:1> explanation, will be important for <s:1> なテ and <s:1> であると であると であると to study えられた in the future.

项目成果

自然免疫 Vol. 1

自然免疫卷 1

• 发表时间: 2004
• 作者: Masaaki Miyamoto;et al.;宮本 正章
• 通讯作者: 宮本 正章

Phase II study of irinotecan, leucovorin, 5-fluorouracil and tegafur/uracil for metastatic colorectal cancer.

伊立替康、亚叶酸、5-氟尿嘧啶和替加氟/尿嘧啶治疗转移性结直肠癌的 II 期研究。

• 发表时间: 2005
• 期刊: J Chemo ther 17
• 作者: Kono T;Aabe T et al.
• 通讯作者: Aabe T et al.

自然免疫vol.2

自然免疫第2卷

• 发表时间: 2005
• 作者: Kono T;Aabe T et al.;Ayabe T et al.;Ebisawa Y et al.;Kono T et al.;Kohgo Y;綾部時芳
• 通讯作者: 綾部時芳

Mouse Paneth cell responses to cell surface glycolipids of virulent and attenuated pathogenic bacteria.

小鼠潘氏细胞对强毒和减毒病原菌细胞表面糖脂的反应。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Infect Immun 73(in press)
• 作者: Tanabe et al.

Direct evidence that induced nitric oxide in hepatocytes prevents liver damage during lipopolysaccharide tolerance in rats.

直接证据表明，肝细胞中诱导的一氧化氮可预防大鼠脂多糖耐受期间的肝损伤。

• 发表时间: 2004
• 期刊: J Surg Res 118
• 作者: Tanabe et al.;Tanabe et al.;Ayabe T et al.;Ebisawa Y et al.
• 通讯作者: Ebisawa Y et al.