がん化における低分子量GTP結合蛋白質Ralの機能

低分子量GTP结合蛋白Ral在致癌作用中的作用

• 批准号: 20013021
• 负责人: 堀内 久徳
• 金额: $ 8.32万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20013021/
• 关键词: がん; Ral; RalGAP; GAP; GTP結合蛋白質; Rho; アクチン; RaIGAP

Ralは、エフェクターは未だ同定されていないが、細胞増殖・癌化を制御する。Ralの抑制性活性制御因子であるRal-GAPは未同定であり、Rasファミリーの中では同定されるべき最後のGAPであったが、我々は、Ral-GAPの同定に成功した。Ral GAPは、活性を持つαサブユニットとβサブユニットのヘテロダイマーであり、哺乳類では活性サブユニットは2分子(α1およびα2)が存在していた。我々はRalGAP-1(α1β)とRalGAP-2(α2β)と名付けた(投稿中)。さらに、それぞれのサブユニットの遺伝子KOマウスを作成した。α2サブユニット遺伝子M変マウスは、正常発生を示したが、高発現する肺等では、Ralの活性は数倍上昇していた。膀胱ではα1サブユニットの発現は低く、ほとんどがα2サブユニットである。非浸潤性膀胱癌細胞株では、α2サブユニットの高い発現を認めたが、浸潤性を呈する癌細胞株ではα2サブユニットの発現量は低下していた。RalGAPの膀胱癌浸潤性への関与が考慮される。現在、ヒト癌組織における活性型Ras、活性化Ralの定量およびRalGAP発現量の定量を行っている。また、Ralは、Rasの穎粒に位置しており、Ras依存性の化学発がんモデルにおいて、Ralの関与を解析した。すなわち、Ras依存性とされる膀胱癌を化学物質によりα2サブユニット遺伝子改変マウスに誘導したが、正常型に比べ、α2サブユニット遺伝子改変マウスに生じた膀胱癌は高い悪性度を持ち浸潤性を示した(投稿準備中)。癌浸潤に対するRalおよびRalGAPの重要性が示唆された。また、癌浸潤では、アクチン細胞骨格系の再構成が重要であるが、直鎖状アクチン伸長因子であるmDialとDaamlがRhoの制御を受けることを無細胞系で証明し(JBC, 2009)た。さらに、mDialおよびDamml結合蛋白質として、ゲルゾリンファミリーに属するFlightless-Iを同定し、RhoとFlightless-Iが協調してmDialおよびDammlを活性化し、直鎖状アクチンを精製することを証明した。

Ral, エフェ タ タ タ タ だ are not だ to されて な な が が, cell proliferation and carcinogenesis を control する. Ral の inhibitory activity suppression factor で あ る Ral - GAP は failed with で あ り, Ras フ ァ ミ リ ー の in で は with fixed さ れ る べ き finally の GAP で あ っ た が, I 々 は, Ral - GAP の with に successful し た. Ral GAP は, active を つ alpha サ ブ ユ ニ ッ ト と beta サ ブ ユ ニ ッ ト の ヘ テ ロ ダ イ マ ー で あ り, mammals で は active サ ブ ユ ニ ッ ト は 2 molecules (alpha 1 お よ び alpha 2) exist が し て い た. I 々 々 RalGAP-1(α1β)とRalGAP-2(α2β)と (submission in progress). Youdaoplaceholder0, それぞれ サブユニット サブユニット サブユニット 伝 offspring KO それぞれ ウスを are made as た た. Alpha 2 サ ブ ユ ニ ッ ト heritage 伝 son M - マ ウ ス は, born normal 発 を し た が, high 発 now す る lung etc で は, Ral は の activity many times rise し て い た. The bladder is characterized by <s:1> <s:1> α1サブユニット サブユニット, <s:1> low く and ほとん <s:1> がα2サブユニットである. Non invasive bladder cancer cell line で は, alpha 2 サ ブ ユ ニ ッ ト の high い 発 を now recognize め た が, invasive を す る cancer cells で は alpha 2 サ ブ ユ ニ ッ ト の 発 now low quantity は し て い た. RalGAP is associated with the invasiveness of へ へ in bladder cancer and が. Consider される. Now, ヒ ト cancerous tissue に お け る active Ras, activeness Ral の quantitative お よ び RalGAP 発 line amount is の quantitative を っ て い る. ま た, Ral は, Ras の clever grain に position し て お り, Ras dependence の chemical 発 が ん モ デ ル に お い て, Ral の masato and analytical し を た. す な わ ち, Ras dependability と さ れ る bladder を chemicals に よ り alpha 2 サ ブ ユ ニ ッ ト heritage 伝 child change - マ ウ ス に induced し た が, than normal type に べ, alpha 2 サ ブ ユ ニ ッ ト heritage 伝 child change - マ ウ ス に raw じ た bladder cancer high は い 悪 sex degrees を hold ち invasive を shown し た (contribute to). The importance of cancer invasion に for するRalおよびRalGAP が indicates された. ま た, carcinoma infiltration で は, ア ク チ ン cells bone is the smallest の が important で あ る が, straight lock ア ク チ ン elongation factor で あ る mDial と Daaml が Rho の suppression を by け る こ と を no cell line で prove し た (JBC, 2009). さ ら に, mDial お よ び Damml binding protein と し て, ゲ ル ゾ リ ン フ ァ ミ リ ー に genus す る Flightless -i を with し, Rho と Flightless -i が coordination し て mDial お よ び Damml を activeness し, straight lock ア ク チ ン を refined す る こ と を prove し た.

项目成果

NK cell activating receptors selectively recruit Rab27aor Munc13-4 to perforin-containing granules for

NK 细胞激活受体选择性地将 Rab27a 或 Munc13-4 招募到含有穿孔素的颗粒中

• 发表时间: 2009
• 期刊: Blood 114
• 作者: 2.S.Wood;M.Meeths;CC Chiang;A.Bechensteen;J.Boelens.C.
• 通讯作者: J.Boelens.C.

Biochemical Characterization of the Rho GTPase-regulated Actin Assembly by Diaphanous-related Formins, mDial and Daaml, in Platelets

血小板中透明相关福明、mDial 和 Daaml 的 Rho GTP 酶调节肌动蛋白组装的生化特征

• 发表时间: 2008
• 期刊: J. Biol. Chem. 283
• 作者: T. Higashi;T. Ikeda;R. Shirakawa;H. Kondo;M. Kawato;M. Horiguchi;T. Okuda;K. Okawa;S. Fukai;O. Nureki;T. Kita;H. Horiuchi
• 通讯作者: H. Horiuchi

GTP-induced dense-granule secretion in platelets is mediated by Ral GTPase-exocyst pathway

GTP 诱导的血小板致密颗粒分泌是由 Ral GTPase-exocyst 途径介导的

• 发表时间: 2008
• 期刊: J Biol Chem 283
• 作者: M. Kawato;R. Shirakawa;H. Kondo;T. Higashi;T. Ikeda;S. Fukai;O. Nureki;T. Kita;H. Horiuchi
• 通讯作者: H. Horiuchi

Flightless-I (Fli-I) regulates the actin assembly activity of Diaphanous-related formins (DRFs), Daaml and

Flightless-I (Fli-I) 调节 Diaphanous 相关福明 (DRF)、Daaml 和

• 发表时间: 2010
• 期刊: J Biol Chem.
• 作者: T.Higashi;T.Ikeda;T.Murakami;R.Shirakawa;Mitsunori Kawato;K.
• 通讯作者: K.

活性化血小板における濃染顆粒放出の分子メカニズム

活化血小板中高度染色颗粒释放的分子机制

• 发表时间: 2008
• 作者: Sakamoto;N.;Yamashita JK;堀内久徳
• 通讯作者: 堀内久徳