低分子量のG蛋白質Rab5が統御する小胞輸送の分子的解明と分子シャペロンの関係

細胞内小器官間の高分子の輸送は小胞輸送によりなされるが、それは、まず、輸送小胞が形成され、それが標的膜に結合し、融合することで輸送が完了する。近年、その分子機構が明らかになりつつあるが、その必須制御因子のひとつとしてRasファミリーの低分子量GTP結合蛋白質であるRab蛋白質が注目されている。われわれは、本研究において、エンドサイトーシス経路の膜融合に必須な制御因子Rab5の機能の分子的解明を進めた。すでに我々はRab5オーバーレイ法にてウシ脳細胞簀.に数個.Rad5結合蛋白賛を確認していたが、昨年度はそのひとりであるp60を同定・解析した。p60はRab6に対するGDP/GTP交換促進因子(GEF)であり、Rab5の標的因子Rabaptin5と複合体を形成して存在し、エンドソーム同志の膜結合の必須因子として機能することを初めて見い出し、p60をRabex5(Rabaptin5 associateed exchange factor)と名付けた。GEFと標的因子が複合体を形成して機能することはRasスーパーファミリーーの分野で初めての知見であり、それ{こよって膜が結合融合する領域でRab5がクラスターを形成するというモデルを提鳴した。さらに、共同研究で我々はアポトーシス時のエントソーム膜融合の停止の原因がRab5の標的因子Rabaptin5の特異的分解による可能性を示した。そして、今年度は、別のRab5結合蛋白質P50の精製を峠え、部分アミノ酸配列を決定した。それは、既知の蛋白質GFAP(glial fibrillary acidic protein)であった。現在、GFAPとRab5との関係を猿を解析中である。

細胞内小器官間の高分子の輸送は小胞輸送によりなされるが、それは、まず、輸送小胞が形成され、それが標的膜に結合し、融合することで輸送が完了する。近年、その分子機構が明らかになりつつあるが、その必須制御因子のひとつとしてRasファミリーの低分子量GTP結合蛋白質であるRab蛋白質が注目されている。われわれは、本研究において、エンドサイトーシス経路の膜融合に必須な制御因子Rab5の機能の分子的解明を進めた。すでに我々はRab5オーバーレイ法にてウシ脳細胞簀.に数個.Rad5結合蛋白賛を確認していたが、昨年度はそのひとりであるp60を同定・解析した。p60はRab6に対するGDP/GTP交換促進因子(GEF)であり、Rab5の標的因子Rabaptin5と複合体を形成して存在し、エンドソーム同志の膜結合の必須因子として機能することを初めて見い出し、p60をRabex5(Rabaptin5 associateed exchange factor)と名付けた。GEFと標的因子が複合体を形成して機能することはRasスーパーファミリーーの分野で初めての知見であり、それ{こよって膜が結合融合する領域でRab5がクラスターを形成するというモデルを提鳴した。さらに、共同研究で我々はアポトーシス時のエントソーム膜融合の停止の原因がRab5の標的因子Rabaptin5の特異的分解による可能性を示した。そして、今年度は、別のRab5結合蛋白質P50の精製を峠え、部分アミノ酸配列を決定した。それは、既知の蛋白質GFAP(glial fibrillary acidic protein)であった。現在、GFAPとRab5との関係を猿を解析中である。