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タンパク質合成系の再構成に向けたコムギ胚芽翻訳因子の分画

小麦胚芽翻译因子的分离用于蛋白质合成系统的重建

基本信息

批准号：
20034040
负责人：
高井和幸
金额：
$ 1.73万
依托单位：
Ehime University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20034040/
关键词：
コムギ胚芽翻訳因子再構成

项目摘要

将来,人工細胞の構築など,合成生物学的な研究を進めるために,再構成された無細胞タンパク質合成系は,中心的な役割を果たすと期待される.タンパク質合成系はバクテリアと真核細胞とでは著しく異なるので,真核細胞型の再構成タンパク質合成系の実現が望まれる.コムギ胚芽由来無細胞タンパク質合成系の成分は極めて頑丈であり再構成に適していると考えられるが,その元になる抽出液は非常に高価であり,このことが再構成系の実現を妨げている.前年度までに,安価に入手できるコムギ胚芽から翻訳伸長因子等を精製し,それらと高価な胚芽抽出液からのリボソームとを用いてポリフェニルアラニン合成が可能であることを示した.今年度は,安価な胚芽からのリボソームと高価なリボソームとを比較した.安価な胚芽からのリボソームは,胚乳由来因子によって化学的に損傷を受けている可能性が考えられたが,高価なリボソームよりもわずかに活性が低いだけで,損傷は受けておらず,また,タンパク質合成の正確さにおいても高価なものと同程度であることが明らかになった.これにより,再構成に向けての最大の障害が回避できることがわかった.研究を進めるうちに,コムギリボソームは,他の生物由来のリボソームと比べて,サブユニットに解離しにくいことが判明した.そこで,リボソームをサブユニットに解離させる因子eIF6を大腸菌で発現させ,可溶性の試料として大量に得ることに成功した.これにより,他の翻訳因子の活性を測定するための基礎が確立した.

In the future, there will be a lot of progress in the study of synthetic biology, and then a synthetic system will be formed, and the center will look forward to it. The eukaryotic cell type was then reformed into the synthetic system. The origin of the embryo, the origin of the embryo, the composition of the synthetic system, the composition, the origin, the origin, the origin and the composition of the synthetic system. In the previous year, Ampere began to use various methods such as germ expansion factor and so on, and the extract of germ was used to synthesize the extract of germ. This year, the germ of the year, the embryo, the The genetic factors of endosperm, the chemical factors of endosperm, the possibility of endosperm origin, the possibility of endosperm, the possibility of endosperm. If you don't know what to do, it will be reorganized into a maximum barrier to avoid the damage. In the course of the study, there is a great deal of information about the origin of the biology. it is necessary to determine the origin of the biology. it is necessary to determine the cause of the disease. The dissociation factor eIF6 has been detected, and the soluble material has been detected in large quantities. In the first place, he made sure that the activity of the factor was determined.