液性因子によるエピジェネティクス制御機構の解析

体液因素的表观遗传控制机制分析

• 批准号: 20057005
• 负责人: 高田 伊知郎
• 金额: $ 3.07万
• 依托单位: Keio University (2009)The University of Tokyo (2008)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20057005/
• 关键词: 間葉系幹細胞; 転写; エピジェネティクス制御; 脂肪細胞; 骨芽細胞; 破骨細胞; エピジェネティクス制

研究代表者は平成20年度において当初の研究計画(1)核内受容体機能を制御する細胞外シグナルと制御分子の解明、(II)成熟破骨細胞分化シグナルRANKによるエピジェネティクスの分子機構の解析)として、以下の実験結果を得た。(1)に関しては、葉系幹細胞において、骨芽細胞誘導因子BMP2が抑制型ヒストン修飾(ピストンH3リジン9番目、27番目のメチル化)を誘導する事を見出した。更に脂肪細胞分化誘導因子PPARγ活性化剤(Tro)を投与した所、BMP2と同時投与では脂肪細胞と骨芽細胞分化が促進される結果になったが、BMP2処理1日後にTroを添加しても脂肪細胞分化は促進しなかった。この現象は脂肪細胞と骨芽細胞の分化の過程において細胞外分化シグナルがエピジェネティック変動を介し制御する事を世界に先駆けて見出した。(II)に関しては破骨細胞の大量培養系を確立し、細胞質タンパク質、核タンパク質を用いてエストロゲン受容体α(ERα)相互作用因子の精製を行った。質量分析計を用いて既知クロマチンリモデリング因子、転写共役因子、熱ショック蛋白の同定に成功した。更に、破骨細胞分化過程で誘導される因子(EAF1,2)の同定に成功した。EAF1,2いずれも破骨細胞前駆細胞であるRAW264細胞にてERαの転写活性化機能を促進した。これら因子の強発現は破骨細胞分化マーカー遺伝子(カテプシンK,TRAP)の発現を促進するため、新規破骨細胞分化制御因子である事を見出した。更にERαのリガンド(エストロゲン、ラロキシフェン)添加を行い破骨細胞分化における機能を検討した所、リガンド依存的な破骨細胞分化抑制が、EAF1のRNAiによって更に増強される結果になった。以上の結果から多核化した破骨細胞において新たな転写共役因子の同定と機能を見出す事に成功した。

Research representatives は pp.47-53 20 year に お い て の original research projects (1) the capacity of body function inside nuclear を suppression す る extracellular シ グ ナ ル と royal molecular の interpret, (II) mature osteoclast differentiation シ グ ナ ル RANK に よ る エ ピ ジ ェ ネ テ ィ ク ス の molecular institutions の parsing) と し て, the following の be た を 験 results. (1) に masato し て は, leaf stem cells に お い て bud cells, bone induction factor BMP2 が inhibitory ヒ ス ト ン modification (ピ ス ト ン H3 リ ジ ン 9's yard, 27 times の メ チ ル) induced す を る matter を show the し た. More に adipocyte differentiation inducing factor PPAR gamma activeness tonic (Tro) を cast and し た, BMP2 と cast and で は fat cells と bone bud differentiation が promote さ れ る results に な っ た が, BMP2 処 principle 1 に Tro を add し て も adipocyte differentiation は promote し な か っ た. こ の phenomenon は fat cells と bone bud differentiation の の process に お い て cells differentiation シ グ ナ ル が エ ピ ジ ェ ネ テ ィ ッ ク - move を interface し suppression す る を world に 駆 first け て shows し た. (II) に masato し て は osteoclast の mass culture を established し, cytoplasm タ ン パ ク qualitative, nuclear タ ン パ ク qualitative を with い て エ ス ト ロ ゲ ン by alpha let body (ER alpha) interaction factor の refined を line っ た. Quality analysis meter を with い て already know ク ロ マ チ ン リ モ デ リ ン グ factor, planning to write a total service factor, hot シ ョ ッ ク protein の be に successful し た. Further に, the で inducing される factor (EAF1,2) of osteoclast differentiation process に was determined to be successful た た. EAF1,2 ずれ ずれ 駆 osteoclast pre-駆 cells であるRAW264 cells にてERα <s:1> 転 write the activation mechanism that can を promote the た of た. こ れ ら strong factor の 発 は osteoclast differentiation now マ ー カ ー heritage 伝 child (カ テ プ シ ン K, TRAP) の 発 を now promote す る た め suppression, new rules osteoclast differentiation factor で あ る matter を show the し た. More に ER alpha の リ ガ ン ド (エ ス ト ロ ゲ ン, ラ ロ キ シ フ ェ ン) add line を い osteoclast differentiation に お け る function を beg し 検 た, リ ガ ン ド dependent な osteoclast differentiation inhibitory が, EAF1 の RNAi に よ っ て に raised more strong さ れ る results に な っ た. の above results か ら more nucleation し た osteoclast に お い て new た な factor の planning to write a total service be と function を す happened to see に successful し た.

项目成果

破骨細胞におけるエストロゲン受容体α転写共役因子群の同定と解析

破骨细胞中雌激素受体α转录共激活因子的鉴定和分析

• 发表时间: 2009
• 作者: Okada;M.;Takezawa;S.;Mezaki;Y;Yamaoka;I.;Takada;I.;Kitagawa;H. and Kato S.;Yukako Uchiyama;高田伊知郎
• 通讯作者: 高田伊知郎

Switching of chromatin-remodelling complexes for oestrogen receptor-alpha

雌激素受体-α 染色质重塑复合物的转换

• 发表时间: 2008
• 期刊: EMBO Rep. 9
• 作者: Okada;M.;Takezawa;S.;Mezaki;Y.;Yamaoka;I.;Takada;I.;Kitagawa;H. and Kato. S.
• 通讯作者: H. and Kato. S.

Wnt and PPARgamma signaling in osteoblastogenesis and adipogenesis

成骨细胞生成和脂肪生成中的 Wnt 和 PPARgamma 信号传导

• 发表时间: 2009
• 期刊: Nat Rev Rheumatol. 5
• 作者: Takada I;Kouzmenko AP;Kato S
• 通讯作者: Kato S

骨組織分化におけるPPARγ機能制御因子群の解析

PPARγ在骨组织分化中的功能调节因子分析

• 发表时间: 2008
• 作者: Okada;M.;Takezawa;S.;Mezaki;Y;Yamaoka;I.;Takada;I.;Kitagawa;H. and Kato S.;Yukako Uchiyama;高田伊知郎;Shahidul M. Islam;高田伊知郎
• 通讯作者: 高田伊知郎

DNA demethylation in hormone-induced transcriptional derepression.

激素诱导的转录去抑制中的 DNA 去甲基化。

• 发表时间: 2009
• 期刊: Nature 461
• 作者: Kim;M.;Kondo;T.;Takada;I.;Youn;M.;Yamamoto;Y.;Takahashi;S.;Matsumoto;T.;Fujiyama;S.;Shirode;Y.;Yamaoka;I.;Kitagawa;H.;Takeyama;K.;Shibuya;H.;Ohtake;F.;Kato;S.
• 通讯作者: S.