細胞複製における細胞表層タンパク質合成の分子機構

细胞复制过程中细胞表面蛋白合成的分子机制

• 批准号: 63615511
• 负责人: 水野 猛
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1988
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1988 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-63615511/
• 关键词: 大腸菌; 膜タンパク質; 遺伝子発現調節; DNA高次構造; 折れ曲がりDNA; プロモーター機能

本重点研究の目的に沿って細胞複製における細胞表層タンパク質合成の分子機構の解析を、以下の具体的研究計画に基づいて行なった。(1).膜タンパク質ompC遺伝子のプロモーター領域の構造と機能解析。前年度までに、ompCプロモーターの特異的活性化に必須な上流領域の存在を明らかにしてきた。本年度は、このDNA領域の機能を明らかにする目的で、この領域のompCプロモーターに対する相対的位置、方向性などを変化させ、プロモーターの特異的活性化に及ぼす影響を解析した。その結果、上流DNA領域をプロモーター領域から遠ざけてもその機能を発揮することが明らかとなった。その場合、上流領域及びプロモーター領域各DNA間の空間的配置が重要であることも示された。一方、上流領域をプロモーターに対して逆向きに位置させた場合も十分に機能することが明らかになった。(2).膜タンパク質ompF遺伝子のプロモーター領域の構造と機能解析。前年度までに、ompF遺伝子の発現調節に必須なプロモーター上流領域のDNAが特殊な構造(Curved DNA)をとっていることを明らかにしてきた。本年度は、この特殊なDNA構造と遺伝子活性化機構との関連性を解析する目的で、site directed mutagenesis法などでDNA構造を変化させることを試みた。その結果、プロモーター上流のT塩基のクラスター内に塩基置換を導入すると、その領域にDNA高次構造の変化が引き起こされることが示された。また同時に、プロモーター機能にも明らかな変化が生じた。したがって、ompFプロモーター上流に認められる特殊なDNA高次構造は、プロモーター機能にとって重要な役割を担っていることが示唆された。おそらくは、その領域に結合する活性化タンパク質OmpRのDNA識別機構に重要であろうと推定される。以上、本年度の研究計画をほぼ目的どおり達成することができた。

The main purpose of this study is to analyze the molecular mechanism of protein synthesis in cell surface layer along with cell division, and to carry out the following specific research projects. (1). Structure and functional analysis in the field of membrane tamponade ompC gene. In the past year, ompC has been activated in a specific way, which requires the presence of an upstream domain. This year, the function of the DNA domain is clearly defined, and the specific activity and influence of the domain are analyzed. As a result, the upper DNA domain is open to the public. The arrangement of space between DNAs in different situations, upper regions and lower regions is very important. A side, an upper side, a lower side, a lower side. (2). Structure and function analysis of membrane membrane ompF gene In the past, the expression of ompF gene must be regulated by the special structure of DNA in the upstream domain. This year, we will try to analyze the relationship between DNA structure and gene activation mechanism, and site directed mutagenesis method. As a result, the introduction of base substitution in the upstream T base and the transformation of DNA high-order structure in the domain are shown. At the same time, the function of the screen is changed. Special DNA high-order structure, function, and function The DNA recognition mechanism of OmpR is important for the activation of OmpR and its binding domain. This year's research plan aims to achieve the above goals.

项目成果

Maeda,S.,et al.: J.Mol.Biol.202. 433-441 (1988)

Maeda，S.，等人：J.Mol.Biol.202。

Tate,S.ーI.,et al.: J.Bacteriol.

Tate, S.-I. 等人：J. Bacteriol。

Muramatsu,S.,et al.: Mol.Gen.Genet.214. 433-438 (1988)

Muramatsu,S. 等人：Mol.Gen.Genet.214。

Mizuno,T.,et al.: J.Biol.Chem.263. 1008-1012 (1988)

Mizuno，T.，等人：J.Biol.Chem.263。

Maeda,S.,et al.: J.Biol.Chem.263. 14629-14633 (1988)

Maeda，S.，等人：J.Biol.Chem.263。