课题基金 / 基金详情

原核細胞イオン輸送系の解析に基づく種を超えた基本構造の探策

原核細胞イオン輸送系の解析に基づく種を超えた基本構造の探策
基于原核细胞离子传输系统分析探索物种之外的基本结构
批准号:
15013225
负责人:
魚住 信之
金额:
$2.62万
依托单位:
依托单位国家:
日本
项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份:
2003
资助国家:
日本
项目状态:
已结题
起止时间:
2003 至 --

项目摘要

项目成果

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中文摘要
翻译
らん藻Ktr系の破壊株のイオン輸送機能を野生株と比較した。らん藻の破壊株のK^+輸送は減少していることが分かった。また、本輸送系はNa^+に強い依存性があるが、Na^+の輸送活性はほとんど見いだせなかった。また、pHは中性付近で最も輸送活性が高いが、プロトンイオノフォアの添加で輸送活性が阻害されたことから、プロトン駆動力が必須であることが明らかとなった。一方、Ktr破壊株で検討した培養条件で同じ表現系を示すらん藻の二成分系変異株をスクリーニングしたが、Ktr系の破壊株で阻害を受ける二成分系変異株は取得できなった。Ktr/HKT系のイオン選択孔の中には塩基性アミノ酸(Arg)が存在する。ArgをLysへの置換はK^+輸送活性に影響を与えなかった。一方、AlaやGluへの置換はK^+輸送活性を減少させた。本残基がNa^+選択性にも関与することが示唆された。シロイナズナおよび大腸菌KUPの膜貫通構造をCystein scanning法で決定する。既に蛋白質内に存在する4っのCysをSerに置換してもK^+輸送活性を維持することを確認している。膜貫通領域の前後にCysを導入し、スフェロプラストを用いて膜透過性NEM-biotinmaleimideと膜非透過性MTSETの2つのSH試薬を用いて膜トポロジーを決定したした。先にアルカリフォスファターゼ融合法で決定したシロイナズナAtKUP1のトポロジーと比較したところ異なる箇所が見出された。
英文摘要
らん藻Ktr系の破壊株のイオン輸送機能を野生株と比較した。らん藻の破壊株のK^+輸送は減少していることが分かった。また、本輸送系はNa^+に強い依存性があるが、Na^+の輸送活性はほとんど見いだせなかった。また、pHは中性付近で最も輸送活性が高いが、プロトンイオノフォアの添加で輸送活性が阻害されたことから、プロトン駆動力が必須であることが明らかとなった。一方、Ktr破壊株で検討した培養条件で同じ表現系を示すらん藻の二成分系変異株をスクリーニングしたが、Ktr系の破壊株で阻害を受ける二成分系変異株は取得できなった。Ktr/HKT系のイオン選択孔の中には塩基性アミノ酸(Arg)が存在する。ArgをLysへの置換はK^+輸送活性に影響を与えなかった。一方、AlaやGluへの置換はK^+輸送活性を減少させた。本残基がNa^+選択性にも関与することが示唆された。シロイナズナおよび大腸菌KUPの膜貫通構造をCystein scanning法で決定する。既に蛋白質内に存在する4っのCysをSerに置換してもK^+輸送活性を維持することを確認している。膜貫通領域の前後にCysを導入し、スフェロプラストを用いて膜透過性NEM-biotinmaleimideと膜非透過性MTSETの2つのSH試薬を用いて膜トポロジーを決定したした。先にアルカリフォスファターゼ融合法で決定したシロイナズナAtKUP1のトポロジーと比較したところ異なる箇所が見出された。
期刊论文(12)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
水谷昭文, 佐藤陽子, 松田信行, 加藤靖浩, 魚住信之: "植物カリウムイオン輸送系と生理的役割"植物細胞工学別冊 秀潤社. 18. 40-47 (2003)
Akifumi Mizutani、Yoko Sato、Nobuyuki Matsuda、Yasuhiro Kato、Nobuyuki Uozumi:“植物钾离子转运系统及其生理作用”植物细胞工程特刊 Shujunsha. 18. 40-47 (2003)。
DOI: --
发表时间:
期刊:
影响因子: --
作者: []
通讯作者:
Kato Y., Hazama A., Yamagami M., Uozumi N.: "Addition of a peptide tag at the C terminus of AtHKT1 inhibits its Na^+ transport."Biosci.Biotech.Biochem.. 67. 2291-2293 (2003)
Kato Y.、Hazama A.、Yamagami M.、Uozumi N.:“在 AtHKT1 的 C 末端添加肽标签会抑制其 Na+ 转运。”Biosci.Biotech.Biochem.. 67. 2291-2293 (2003)
DOI: --
发表时间:
期刊:
影响因子: --
作者: []
通讯作者:
Berthomieu, P., et al.: "Functional analysis of AtHKT1 in Arabidopsis shows that Na^+ recirculation by the phloem is crucial for salt tolerance."EMBO J.. 22. 2004-2014 (2003)
Berthomieu, P., 等人:“拟南芥中 AtHKT1 的功能分析表明,韧皮部的 Na^ 再循环对于耐盐性至关重要。”EMBO J.. 22. 2004-2014 (2003)
DOI: --
发表时间:
期刊:
影响因子: --
作者: []
通讯作者:
Umigai, N.et al.: "Topogenesis of two transmembrane type K^+ channels, Kir2.1 and KcsA"J.Biol.Chem.. 278. 40373-40384 (2003)
Umigai, N.等人:“两种跨膜类型 K^ 通道的拓扑发生,Kir2.1 和 KcsA”J.Biol.Chem.. 278. 40373-40384 (2003)
DOI: --
发表时间:
期刊:
影响因子: --
作者: []
通讯作者:
共 6 条
    塩害から種子形成を守るナトリウム輸送体の協奏的機構の探究
    • 批准号:
      24H00495
    • 项目类别:
      Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
    • 资助金额:
      $23.88万
    • 财政年份:
      2024
    • 负责人:
      魚住 信之
    • 依托单位:
    Functional expression system for plant ion transport system in Escherichia. coli
    • 批准号:
      21K19060
    • 项目类别:
      Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
    • 资助金额:
      $4.08万
    • 财政年份:
      2021
    • 负责人:
      魚住 信之
    • 依托单位:
    Study on the molecular mechanism of Ca signaling mediated by plant K channels
    • 批准号:
      20KK0127
    • 项目类别:
      Fund for the Promotion of Joint International Research (Fostering Joint International Research (B))
    • 资助金额:
      $11.9万
    • 财政年份:
      2020
    • 负责人:
      魚住 信之
    • 依托单位:
    Kチャネル・Kトランスポーターの調節機構の解析
    • 批准号:
      08F08103
    • 项目类别:
      Grant-in-Aid for JSPS Fellows
    • 资助金额:
      $1.02万
    • 财政年份:
      2008
    • 负责人:
      魚住 信之
    • 依托单位:
    国内基金
    海外基金
    真核生物纤毛基因转录调控的分子机制研究
    • 批准号:
      JCZRJQ202500018
    • 项目类别:
      省市级项目
    • 资助金额:
      --
    • 批准年份:
      2025
    • 负责人:
    • 依托单位:
    基于蛋白质三维结构解析ASGARD古菌与 真核生物的起源过程
    • 批准号:
    • 项目类别:
      省市级项目
    • 资助金额:
      10.0万元
    • 批准年份:
      2025
    • 负责人:
      冯晓远
    • 依托单位:
    单细胞真核生物DNA 6mA甲基化修饰的催化机理研究
    • 批准号:
      2023J05008
    • 项目类别:
      省市级项目
    • 资助金额:
      6.0万元
    • 批准年份:
      2023
    • 负责人:
      陈霁云
    • 依托单位:
    珠江河口微型真核生物与噬菌体对浮游细菌群落下行控制的相对重要性研究
    • 批准号:
      42376086
    • 项目类别:
      面上项目
    • 资助金额:
      51万元
    • 批准年份:
      2023
    • 负责人:
      龚骏
    • 依托单位: