原核生物・真核生物のイオン輸送体を統制する構造の探索

寻找控制原核生物和真核生物中离子转运蛋白的结构

• 批准号: 16013219
• 负责人: 魚住 信之
• 金额: $ 2.94万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16013219/
• 关键词: Ktr系; AtHKT1; 膜挿入; 膜配向性; トランスポーター; チャネル; ラン藻; イオン選択孔

1 ラン藻(Synechocystis sp. strain PCC 6803)のKtr系はCCCPの添加で阻害され、H駆動力のない変異株に発現させると輸送活性が検出できなかったことから、H駆動力がKtr系輸送体に関与することが示唆された。また、ラン藻に高浸透圧ストレスを与えるとKの流出が起こり、そのK流出を補うKの取込みに関与して、浸透圧変化に適応するのに必須なK取込み系として機能していることが明らかとなった。らん藻のHKT/Trk/Ktr系Na/Kトランスポーターにおいて、他の生物のホモログ輸送体からは見いだされていない細胞質性因子KtrAとKtrEをHisタグ融合蛋白質として大腸菌で発現させて精製した。2 ラン藻・シロイヌナズナ・小麦のNa/Kトランスポーター(KtrABE,AtHKT1,wHKT1)は8回の膜貫通構造をとる。第8番目の膜貫通領域に存在する正電荷アミノ酸を他のアミノ酸に置換してイオン選択性への関与を検討した。野性株のArgからLysへの置換はイオン透過性が保持されたが、負電荷アミノ酸や極性のないアミノ酸への置換はイオン透過性が失われた。この正電荷アミノ酸は本輸送体の機能に重要であることが分かった。3 小胞体膜挿入系を用いてShaker型Kチャネルの膜挿入機構を検討したところ、植物のKチャネルと比較して膜電位センサー以外の膜貫通領域の挿入機構は同様であり、膜電位センサーを形成する第3番目の膜貫通領域は自律的に膜へ挿入することが明らかとなった。4 ラン藻のNa/Hトランスポーターのうち他の生物では見いだすことができない特徴的な配列を保持した機能不明のトランスポーターを大腸菌発現系で機能発現することが分かり、Na排出活性があることを確認した。植物の報告されているNa/Hトランスポーターと機能の観点からも高いことが分かった。

1. The Ktr system of Synechocystis sp. strain PCC 6803 is resistant to CCCP addition, and the transport activity of the Ktr system is related to the transport activity of the Ktr system. For example, if you want to change the color of the film, you can change the color of the film. HKT/Trk/Ktr is a Na/K receptor protein that is produced by E. coli and purified by E. coli. 2. Na/K transition of wheat (KtrABE,AtHKT1,wHKT1) and 8-loop membrane penetration structure. The relationship between the positive charge and the acid substitution in the membrane penetration region of the eighth embodiment is discussed. Wild plant Arg, Lys, and substitution have the same permeability, negative charge, and polarity. The positive charge is important for the function of the transport agent. 3. The membrane penetration mechanism of the Shaker type K-cell in the membrane penetration system is discussed in this paper. The membrane penetration mechanism of the membrane penetration field other than the membrane potential field in the plant K-cell is compared. The membrane penetration mechanism of the membrane penetration field in the third paper is discussed in this paper. It is confirmed that the Na/H transport support of 4 species of algae can be seen in other organisms, but the configuration of its unique characteristics is maintained, and the transport support with unknown functions can be functionally realized in the coliform development system. The plant's report is Na/H. The function is to divide the plant into two parts.

项目成果

Na+-dependent K+ uptake ktr system from the cyanobacterium Synechocystis sp PCC 6803 and its role in the early phases of cell adaptation to hyperosmotic shock

• DOI: 10.1074/jbc.m407268200
• 发表时间: 2004-12-24
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Matsuda, N;Kobayashi, H;Uozumi, N
• 通讯作者: Uozumi, N

Mechanosensitivity of GIRK channels is mediated by PKC-dependent channel-PIP interaction

GIRK 通道的机械敏感性由 PKC 依赖性通道-PIP 相互作用介导

• 发表时间: 2004
• 期刊: J.Biol.Chem. 279
• 作者: Zhang;L.;Lee;J-K.;John;S.A.;Uozumi;N.;Kadama;I.
• 通讯作者: I.

Large-scale production of hairy root

毛状根规模化生产

• 发表时间: 2004
• 期刊: Recent progress of biochemical and biomedical engineering in Japan 2
• 作者: Ibuki T.;Tokida Y.;Matsuda N.;Czempinski K.;Muller-Roeber B.;Ona T.;Uozumi N.;Uozumi N.
• 通讯作者: Uozumi N.

Characterization of potassium channels from Arabidopsis thaliana.

拟南芥钾通道的表征。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Improvement of forest resources for recyclable forest products
• 作者: Ibuki T.;Tokida Y.;Matsuda N.;Czempinski K.;Muller-Roeber B.;Ona T.;Uozumi N.
• 通讯作者: Uozumi N.