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細胞膜ラフト領域局在化シグナルの解明

质膜筏区域定位信号的阐明

基本信息

批准号：
15013237
负责人：
前川昌平
金额：
$ 4.48万
依托单位：
Kobe University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15013237/
关键词：
ラフトコレステロール NAP-22 情報伝達カルシウムシナプス

项目摘要

1.中枢神経細胞のラフト画分の主要タンパク質であるNAP-22の脂質結合について解析し、20-25番目のアミノ酸残基の欠失がコレステロール結合性に、41-50番目のアミノ酸残基の欠失がプォスプァチジルエタノールアミン結合性に影響することを見い出した。32-40番目のアミノ酸残基の欠失はこれら双方に影響した。2.可溶性画分のNAP-22結合因子としてSSeCKS, NSF, Rab3A, kinesin HC等、細胞内膜動態に関与する種々の因子を見い出した。3.ラフト構築因子の相互作用解析にBlue-Native PAGEが有効であることを見い出し、神経細胞、ミエリン膜由来のラフト構築因子の相互作用を解析し、NAP-22がオリゴマーとして存在していること、H^+-ATPaseがラフト局在因子であり、複合体としてBlue-Native PAGEで分離できることを見い出した。4.カルシウムシグナルに関わるニューロカルシンやアネキシン6がNAP-22と結合することでラフトに局在することを見い出した。この知見はNAP-22を足場とするカルシウムシグナル機構の存在を示唆している。またニューロカルシン結合因子としてCaMKIIを見い出した。5.初代培養神経細胞の脂質染色とラフト局在因子の染色によりNAP-22の神経突起伸展に伴う局在変化とラフト局在脂質の動態を解析した。6.脳下垂体の細胞膜ラフトの主要因子としてPOタンパク質を同定し、組織化学により局在を解析した。また脳シナプス部位に局在する新規ラフト因子w同定し解析を進めつつある。

1. The analysis of lipid binding of NAP-22, the effect of loss of N-terminal amino acid residues on lipid binding of NAP-22, and the effect of loss of N-terminal amino acid residues on lipid binding of NAP-22, NAP-22, and NAP-22 on lipid binding of NAP-22, NAP-22, NAP-22 32-40 The loss of amino acid residues in the protein has a negative effect on both sides. 2. Soluble NAP-22 binding factors such as SSeCKS, NSF, Rab3A, kinesin HC, and other factors related to intracellular membrane dynamics are also found 3. Blue-Native PAGE analysis of the interaction between the building factors of the protein, the interaction between the building factors of the neuron and the membrane, NAP-22 analysis of the interaction between the building factors of the protein, the existence of the complex, and the Blue-Native PAGE analysis of the interaction between the building factors of the protein, the NAP-22 analysis of the interaction between the building factors of the protein, the NAP-22 analysis of the interaction between the building factors of the protein, the NAP-22 analysis of the interaction between the building factors of the protein, the NAP-22 analysis of the interaction between the building factors of the protein and the complex. 4. The NAP-22 is a combination of the following: This information indicates that NAP-22 is fully operational. CaMKII is the most important factor in the development of the disease. 5. Lipid Staining in Primary Cultured Neurocytes: Analysis of Lipid Dynamics in Cell Staining by NAP-22 6. The main factors of pituitary cell membrane development are determined by histochemistry. The new factor w is the same as the analysis.